Analýza organických kyselin novým postupem extrakční derivatizace v krevní plasmě a séru technikou GC/MS

Lucie JAHODOVÁ

Bakalářská práce

Práce je veřejnosti přístupná ve fakultní knihovně ZSF JU v úředních hodinách.

Analysis of organic acids by a novel procedure of extractive derivatization in human plasma and serum by GC/MS

Anotace:

Bakalářská práce byla zpracována na téma {\clqq}Analýza organických kyselin novým postupem extrakční derivatizace v krevní plasmě a séru technikou GC/MS{\clqq}. Cílem této práce bylo vypracování metody pro rychlé stanovení organických kyselin novým postupem extrakční derivatizace, identifikovat a stanovit organické kyseliny v tělních tekutinách, porovnat jejich zastoupení a vyhodnotit možnosti uplatnění metody v klinické diagnostice. Tělní tekutiny obsahují stovky organických kyselin, které spoluvytvářejí klinický obraz o zdravotním stavu pacienta. Současný výzkum se zaměřuje na zavedení metod umožňujících komplexní, metabolomickou analýzu těchto diagnosticky významných metabolitů. Pro separaci, stanovení a identifikaci organických kyselin ve složitých biologických matricích se v současné době analytikovi nabízí velký počet metod a několik účinných analytických separačních technik. V první, teoretické části bakalářské práce, jsou shrnuty poznatky o vlastnostech organických kyselin a možnostech jejich stanovení. V praktické části byla vypracována metoda pro rychlé stanovení organických kyselin v tělních tekutinách pomocí GC/MS. Pomocí této techniky lze analyzovat velké množství organických kyselin v minimálním objemu tělní tekutiny. Byla provedena derivatizace souboru několika desítek organických kyselin ethylchlormravenčanem ve vodném médiu. Reakce probíhá rychle a za laboratorní teploty. Použitelnost vypracované metody byla ověřena na analýze organických kyselin v biologických vzorcích. Ve vzorcích krevního séra a plasmy byly pomocí použité metody, retenčních dat a EI hmotnostních spekter identifikovány desítky organických kyselin. Pokusy provedené v této práci prokázaly, že derivatizace pomocí chlormravenčanů ve vodném prostředí je poměrně jednoduchou, rychlou a slibnou metodou pro analýzu organických kyselin. Pro možné uplatnění metodiky v klinické diagnostice je nezbytný další experimentální výzkum, aby bylo možno vymezit přednosti a omezení tohoto nového metodického přístupu.

Abstract:

The theme of the bachelor{\crq}s thesis was ``The Analysis of Organic Acids by New Extractive Derivatization Process in Blood Plasma and Serum Using the GC/MS Technique{\crqq}. The objective of the thesis was to develop a method for fast determination of organic acids by a new process of extractive derivatization, to identify and determine organic acids in body fluids, to compare their abundance and to evaluate the possibility of implementation of this method in clinical diagnostics. Body fluids contain hundreds of organic acids, which co-create a clinical picture of a patient{\crq}s health condition. The current research focuses on implementation of methods providing for comprehensive, metabolism-based analysis of these metabolites important from the point of view of diagnostics. Nowadays, an analyst can select from a wide range of methods and several effective analytical and separation techniques for separation, determination and identification of organic acids in complex biological matrices. In the introductory, theoretical part of the bachelor{\crq}s thesis, the knowledge of properties of organic acids and possibilities of their determination are summarized. In the practical part, the method of fast determination of organic acids in body fluids by the GC/MS techniques was developed. By means of this technique, it is possible to analyze large quantities of organic acids in minimum volume of body fluid. Derivatization of a set of several tens of organic acids with ethyl chloroformate in aqueous medium was carried out. The reaction proceeds very fast and at laboratory temperature. The applicability of the developed method was verified through analysis of organic acids in biological samples. In samples of blood serum and plasma, tens of organic acids were identified by means of the above-mentioned method, retention data and EI mass spectra. Experiments performed for the purpose of this thesis proved that derivatization with chloroformates in aqueous medium is a relatively simple, fast and promising method for analysis of organic acids. Follow-up experimental research is necessary to make the methodology applicable in clinical diagnostics and to define advantages and limitations of this new methodological procedure.

Klíčová slova

chromatogram, derivatizace, hmotnostní spektrometrie, organické kyseliny, plynová chromatografie

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 3. 9. 2007

Zveřejnit od: 3. 9. 2007

Identifikátor: 7005

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 1. 10. 2007
• Vedoucí: Ing. Helena Zahradníčková, MUDr. Miroslav Verner

JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH

Zdravotně sociální fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biofyzika / Biofyzika a zdravotnická technika