Histologická a histochemická analýza retrakční kapsy pars tensa ušního bubínku u dětí

MUDr. Milan Urík, Ph.D.

Doctoral thesis

Histological and histochemical analysis of retraction pocket pars tensa of tympanic membrane in children

Abstract:

Cíle: Histologická a histochemická analýza retrakční kapsy pars tensa ušního bubínku u dětí. Identifikace znaků typických pro cholesteatom a podpora retrakční teorie vzniku cholesteatomu. Dizajn studie: prospektivní studie analyzující 31 chirurgicky odebraných retrakčních kapes. Pracoviště: Fakultní nemocnice, Pracoviště dětské medicíny. Metody: Retrakční kapsy zpracované standardním procesem pro účely světelné mikroskopie, obarveny hematoxylin-eozinem. K upřesnění pozorovaných nálezů byla použita barvení k průkazu kolagenního vaziva dle Van Giesona, k průkazu elastických vláken barvení dle Verhoeffa, k průkazu kyselých mukopolysacharidů barvení Alciánovou modří a k průkazu polysacharidů v bazální membráně metoda PAS (Periodic Acid Schiff). Výsledky: V retrakčních kapsách jsme pozorovali následující nálezy: hyperkeratózu, nezralé kapiláry, subepiteliální fragmentovaná elastická vlákna, myxoidní změny, subepiteliální zánětlivý infiltrát, přítomnost rete pegs, pilovitou morfologii dlaždicového epitelu, intraepiteliální zánětlivou celulizaci, intraepiteliální spongiózu a parakeratózu. Nepozorovali jsme poruchu kontinuity bazální membrány. Délka a tloušťka retrakční kapsy, tloušťka epidermis, přítomnost rete pegs, intraepiteliální zánětlivé celulizace a fragmentovaných elastických vláken byly četnější ve skupině retrakčních kapes stádia III dle Charachona. Závěr: Popsali jsme morfologické abnormity ve struktuře retrakční kapsy pars tensa ušního bubínku. Uvedené abnormity se vyskytují ve struktuře cholesteatomu, podporují tak retrakční teorii jeho vzniku. Klíčovou roli v patogenezi retrakční kapsy sehrává dle pozorování zánět. Četnost některých abnormit vzrůstá se stadiem retrakční kapsy (II - III dle Charachona). Porucha kontinuity bazální membrány není pro retrakční kapsu typická.

Abstract:

Aims: Histological and histochemical analysis of retraction pocket of pars tensa of tympanic membrane in children. Identification of signs typical for cholesteatoma and support for a retraction theory of cholesteatoma formation. Study design: A prospective study analysing 31 samples of retraction pockets taken during surgery. Departments: University Hospital, Children's Medical Centre Methods: Retraction pockets were processed by a standard process for light microscopy, stained by hematoxilin - eosin. Van Gieson's stain was used for differential staining of collagen, Verhoeff's stain for elastic fiber tissues, Alcian blue for acidic polysaccharides and PAS (Periodic Acid Schiff) method for basement membrane polysaccharides. Results: The following findings were observed in retraction pockets: hyperkeratosis, immature capillaries, subepithelial fragmented elastic fibres, myxoid changes, subepithelial inflammatory infiltration, rete pegs, sawtooth morphology of squamous epithelium, intraepithelial inflammatory cellularizations, intraepithelial spongiosis and parakeratosis. No basement membrane continuity interruptions were observed. Length and thickness of retraction pocket, thickness of epidermis, occurrence of rete pegs and frequency of fragmented elastic fibres was higher in a grade III than grade II (according to Charachon). Conclusion: Morphological abnormalities in the structure of retraction pocket were described. The changes are typical for a structure of cholesteatoma, supporting retraction theory of its origin. Our observations show that it is inflammation that plays a key role in the pathogenesis of retraction pocket. The frequency of some of the changes increases with the stage of retraction pocket (II – III according to Charachon). Basement membrane continuity interruptions are not typical for retraction pockets.

Keywords

retrakční kapsa, histologická analýza, cholesteatom, dětský věk, retraction pockets, histological analysis, cholesteatoma, children

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 12. 1. 2017

Thesis defence

• Date of defence: 6. 3. 2017
• Supervisor: prof. MUDr. Ivo Šlapák, CSc.
• Reader: MUDr. Jan Kluh, prof. MUDr. Ivo Stárek, CSc.

Masaryk University

Faculty of Medicine

Doctoral programme / field:
Otorhinolaryngology (4-years) / Otorinolaryngology