Zavedení digitální morfologie v hematologické laboratoři

Martina STRUSKOVÁ

Bakalářská práce

The introduction of digital morphology in laboratory hematology

Anotace:

Cílem mé bakalářské práce je ve zkušebním provozu porovnat výsledky diferenciálního rozpočtu leukocytů pomocí klasického mikroskopu a digitálního morfologického systému společnosti CellaVision AB (Lund, Švédsko) Cella Vision DM96?. Zaměřila jsem se na kontrolu správnosti a přesnosti měření a porovnala jsem pracovní, časovou a finanční náročnost.Metodická část této práce byla provedena v hematologické laboratoři v Nemocnici České Budějovice, a.s., kde jsem zaměstnána. Soubor dat tvořilo 50 vzorků, jejichž krevní obraz včetně diferenciálního rozpočtu leukocytů byl analyzován na hematologickém analyzátoru Coulter LH 755. Vyhodnoceny byly dle příslušných pravidel stanovených v SOPu (standardně operační postupy) laboratoře a tzv. varovných hlášení analyzátoru informujících o podezření na přítomnost nezralých či atypických forem buněčných populací a byly označeny jako nutné k mikroskopické kontrole. Po zhotovení a obarvení nátěru byly tyto vzorky mikroskopicky vyhodnoceny klasickým mikroskopem a zároveň v rámci zkušebního provozu zanalyzovány digitálním mikroskopem Cella Vision DM96. Výsledky měření jsou zaznamenány v příslušných grafech vyjadřující vztahy správnosti a korelace buněčných populací. Zdroje původních dat zanesené do tabulek se nacházejí v příloze. Korelace jednotlivých populací leukocytů preklasifikované digitálním mikroskopem ve vztahu ke konvenční mikroskopii jsou pro neutrofily 0,91, lymfocyty 0,96, monocyty 0,89, tyče 0,78. Hodnoty pro eosinofily a basofily neuvádím neb z důvodu nízkého buněčného zastoupení v nátěrech jsou málo vypovídající. Hypotéza, že výsledky diferenciálního rozpočtu leukocytů vyhodnocené digitálním systémem Cella Vision DM96? jsou neuspokojivé, se potvrdila , zejména kvůli neutrofilům. Korelace leukocytů po manuální korekci je pro neutrofily 0,97, lymfocyty 0,98, monocyty 0,94, tyče 0,96. V tomto případě hypotéza, že výsledky po manuální reklasifikaci jsou srovnatelné s klasickou mikroskopií, je pravdivá. Celkový průměrný čas vyhodnocení digitální morfologií je 9´55´´, kde čas stanovení analyzátorem trval v průměru 2´30´´ a čas obsluhy provádějící manuální korekci byl v průměru 6´55´´. Naměřený průměrný čas standartní mikroskopie byl 5´10´´. Z výsledných hodnot vyplývá, že časová náročnost analýzy diferenciálního rozpočtu leukocytů mikroskopem Cella Vision DM96? je větší než u klasické mikroskopie. Významným aspektem, který ovlivňuje výsledky preklasifikace je kvalita nátěru a barvení. Sledované vzorky byly zpracovávány manuálně. Po ukončení studie jsem měla možnost pracovat se vzorky strojově natíranými a barvenými. U takto připravených nátěrů je časová náročnost podstatně menší. Pro skupinu leukopenických vzorků (0,1 ? 3,9 x 109G/l) je časově výhodnější manuální reklasifikace diferenciálního rozpočtu v digitálním automatu než vyhodnocení klasickým mikroskopem. Časová úspora těchto vzorků je téměř 50%. Finanční náročnost vychází z časové, respektive z nákladů na čas obsluhy provádějící manuální reklasifikaci digitálně vyhodnoceného nátěru. Provozní náklady jsou vyšší o náklady na časový rozdíl mezi klasikou a digitálním mikroskopem. Vezmeme-li v úvahu ještě cenu přístroje, tak finanční zatíženost mnohonásobně stoupne. Přesto jsou tu významné aspekty, pro které je digitální morfologie pořizována. Patří sem archivace výsledků a jejich zpětná dohledatelnost včetně všech snímků buněk, možnost tzv. konzultace na dálku, ukládání snímků do elektronických lékařských záznamů. Digitální systém je také dobrým pomocníkem v edukaci pracovníků a stážistů.

Abstract:

The aim of my bachelor´s work is to compare the results of the diferential divide of leukocyte achieved in a trial run by a classical microscope and by a digital morphological system from the company CellaVision AB (Lund, Švédsko) Cella Vision DM96?. I concentrated on checking the correctness and accuracy of the measurement and I compared the work, time and financial demands. The methodical part of my work was done in the hematological laboratory in the hospital České Budějovice plc., where I work. The data file was formed of 50 samples, whose blood picture including the diferential divide of leukocyte was analysed at hematological analyzer Coulter LH 755. The samples were evaluated according to the rules stated in SOP of the laboratory and according to as it is called warning reports of the analyzer informing about the suspicion of occurrence of immature or atypical forms of cellular populations, which were marked as necessary for microscopic checking. After making and colouring the blood smear these samples were microscopic evaluated by a classical microscope and at the same time they were, in a trial run, analyzed by a digital microscope Cella Vision DM96. The results of the measurement are placed in corresponding diagrams showing the relations of correctness and correlation of cellular populations. The source of original data is to be found in the enclosure. The correlation of single population of leukocyte preclassified by a digital microscope in relation to conventional microscopy are for neutrofils 0,91, for lymphocytes 0,96, monocytes 0,89, bands 0,78. I don´t mention the figures for eosinofiles and basofiles, because they are of low informative value due to low cellular representation in the smears. The theory about results achieved by the digital system Cella Vision DM96? being unsatisfactory was proved, mainly because of neutrofiles. The leukocyte correlation after manual correction is for neutrofiles 0,97, lymfocyte 0,98, monocytes 0,94, bands 0,96. In this case the theory about results after manual preclassification being comparable to classical microscopy is true. The total average time of evaluation by the digital morphology is 9´55´´ where the time of stating by analyzer took on average 2´30´´ and the operation time of manual correction was on average 6´55´´. The measured average time of classical microscopy was 5´10´´.The time demands of the diferential divide of leukocyte analysis done by a microscope Cella Vision DM96? is bigger than by classical microscopy, which emerges from the resulting values. A very important aspect which influences the results of preclassification is the quality of smears and colouring. The observed samples were done manually. After finishing the study I had the oportunity to work with samples done mecanically. With samples prepared this way is the time demands much lower. For the group ofleukopenic samples (0,1 ? 3,9 x 109G/l) the manual preclassification of the diferential divide of leukocyte done mechanically by a digital machine from the point of view of time more favourable than the reclassification done by classical microscope. Time savings of these samples is nearly 50%. The financial demands are based on the time or rather the cost of operation time for people doing the manual reclassification of the digitally evaluated sample. The operating costs are higher at the time difference between classical and digital microscopy. If we take account of the machine price, the finantial demands increase multiply. Although there are some significant aspects the digital morphology is implemented for. For example results archiving and their reverse control including all cell exposures, possibility for so called teleconsultation, saving the exposures in electronic medical records. The digital system is also a significant help for emploees and trainees education.

Klíčová slova

leukocyty, krevní nátěr, diferenciální rozpočet leukocytů, digitální mikroskop, korelační koeficient

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 3. 5. 2013

Zveřejnit od: 3. 5. 2013

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: MUDr. Ivan Vonke

JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH

Zdravotně sociální fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Specializace ve zdravotnictví / Zdravotní laborant