Optimalizace longitudinálního stanovení vlasového kortizolu pomocí kapalinové chromatografie s hmotnostní spektrometrií

Bc. Robin Kotouček

Diplomová práce

Optimization of longitudinal hair cortisol analysis by liquid chromatography and mass spectrometry

Anotace:

Cílem této diplomové práce bylo optimalizovat longitudinální stanovení vlasového kortizolu (HCC) pomocí metody online SPE v kombinaci s kapalinovou chromatografií a hmotnostní spektrometrií (LC-MS). Vzhledem k tomu, že kortizol difunduje do vlasu úměrně své koncentraci v krvi, umožňuje segmentová analýza retrospektivní sledování dlouhodobých hladin endogenního kortizolu. Byla vyvinuta a aplikována matematická korekce založená na kinetice prvního řádu, která umožňuje eliminovat vliv degradace kortizolu směrem k distálním segmentům. V práci byly analyzovány vlasové vzorky od zdravého jedince během osmi měsíců a vzorky od pacientů s psychickými poruchami ve dvou fázích: před léčbou a po léčbě. Výsledky ukázaly trend poklesu HCC směrem k distálním segmentům i možný efekt terapie na snížení HCC po léčbě. Vyvinutá metoda tak představuje spolehlivý, stabilní a reprodukovatelný ná-stroj pro hodnocení dlouhodobé glukokortikoidové zátěže a může najít uplatnění v klinické praxi i výzkumu.

Abstract:

The aim of this thesis was to optimize the longitudinal measurement of hair cortisol concentration (HCC) using online SPE combined with liquid chromatography and mass spectrometry (LC-MS). Since cortisol diffuses into hair proportionally to its blood concentration, segmental hair analysis enables retrospective assessment of long-term endogenous cortisol levels. A mathematical correction based on first-order kinetics was developed and applied to compensate for the degradation of cortisol toward distal hair segments. Hair samples were analyzed from a healthy individual over eight months, as well as from patients with psychiatric disorders in three phases: before treatment and after follow-up. The results showed a consistent trend of decreasing HCC toward distal segments and a potential therapeutic effect reflected in decreased HCC values post-treatment. The optimized method provides a reliable, stable, and reproducible tool for evaluating long-term glucocorticoid exposure and may have applications in both clinical practice and research.

Klíčová slova

vlasový kortizol, HPA osa, LC-MS, online SPE, longitudinální analýza, segmentová analýza, konstanta poklesu hair cortisol, HPA axis, longitudinal analysis, segmental analysis, decline constant

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 15. 5. 2025

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 18. 6. 2025
• Vedoucí: doc. Mgr. Ondřej Peš, Ph.D.
• Oponent: Mgr. Marta Pelcová, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví - Bioanalytik / Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví - Bioanalytik