Vliv imunizace na lipidovou peroxidaci u myší

Bc. Lenka Kramná

Diplomová práce

The influence of immunization on lipid peroxidation in mice

Anotace:

Reaktivní metabolity kyslíku (ROS) a dusíku (RNS) jsou důležitým činitelem ve fyziologii organismu. Vznikají při přenosu elektronu v mitochondriích, jako obranné mechanismy v imunitních buňkách a figurují také v celé řadě signálních drah. Svou reaktivitou však představují nebezpečí i pro vlastní tkáně, k jejichž poškození v určité míře dochází během celého života. V našem pokusu jsme stanovovali míru oxidačního poškození tkání po imunizaci inaktivovaným antigenem z Borrelia afzelii měřením koncentrace malondialdehydu (MDA) ve tkáni jater a sleziny. Kromě míry oxidačního poškození byly u uvedených orgánů sledovány také změny hmotnosti. Sledován byl také vliv CpG-ODN (syntetický analog bakteriální DNA) použitým v imunizační dávce jako adjuvans. Pro pokus byly použity samice myší kmene BALB/c, ze kterých bylo sestaveno 8 skupin po 8 jedincích. 1. skupině byl podáván fyziologický roztok a sloužila jako kontrola. Skupinám 2. – 4. byl podáván celobuněčný antigen Borrelia afzelii v dávkách 7,5 – 2,5 – 0,83 mg/1 dávku/1 myš. Skupiny 5. – 7. dostávaly s antigenem v uvedených dávkách také CpG v množství 65,6 mg/1 dávku/1 myš a 8. skupině bylo podáváno pouze CpG. Pokus trval 9 týdnů a imunizace proběhla celkem 3 x vždy po třech týdnech. Koncentrace MDA byla stanovována testem s kyselinou thiobarbiturovou. Po imunizaci inokulátem obsahujícím CpG byl zjištěn signifikantní nárůst hmotnosti sleziny i jater. Použití imunizační dávky pouze s antigenem nevyvolalo změny u sleziny, u jater byl zaznamenán nárůst. Při měření koncentrace MDA ve tkáni byly zaznamenány zvýšené hodnoty pouze u sleziny, u jater k významným změnám nedošlo. Skupiny pouze s antigenem i skupiny s přídavkem CpG byly v případě sleziny zvýšeny oproti kontrole, od sebe se příliš nelišily. Výjimku tvořila dvojice skupin s největší dávkou antigenu, ve které byl pozorován nárůst množství MDA u skupiny s CpG. Samotné CpG v inokulační dávce také zvyšovalo obsah MDA ve tkáni sleziny, u jater se obsah MDA oproti kontrole nezměnil.

Abstract:

Reactive oxygen and nitrogen species (ROS/RNS) are important factors in physiology of organism. They arise from electron-transport chain in mitochondria, they are produced by immune cells used as a protective mechanisms and they figure also in signalling pathways. They are reactive and therefore dangerous for our own tissues, which they partially damage through the whole life. In our experiment we determined the rate of oxidative damage after immunization with inactivated antigen from Borrelia afzelii using measurement of malondialdehyd (MDA) in liver and spleen. We also measured changes of weight of those organs. The influence of CpG-ODN (synthetic analogue of bacterial DNA) used as an adjuvant was also observated. We used BALB/c female mice, which were organized into 8 groups. There were 8 mice in each group. 1st group served as a control and was immunized with physiological solution. Groups 2nd – 4th were immunized with 7,5 – 2,5 – 0,83 mg of antigen from Borrelia afzelii/1 dose/1 mouse. Groups 5th – 7th were immunized with the same amount of antigen mixed with 65,6 mg CpG/1 dose/1 mouse. 8th group was immunized only with CpG. The whole experiment took 9 weeks and groups were immunized three times. Concentration of MDA was measured by thiobarbituric acid test. Immunization with CpG significantly increased liver and spleen weight. Antigen alone didn´t change spleen weight, liver were increased after immunization. Measurement of MDA concentration in tissues showed increased amount of MDA in spleen, not in liver. Groups with antigen only and groups with CpG were increased compared to the control group in spleen, not very changed between each other. The only exception was between groups with the highest concentration of antigen different in CpG presence, increased amount of MDA was obsarvated in CpG group. Using CpG only increased amount of MDA in spleen, not in liver.

Klíčová slova

reaktivní kyslíkové metabolity, reaktivní dusíkové metabolity, antioxidanty, lipidová peroxidace, imunizace, adjuvans, CpG, reactive oxygen species, reactive nitrogen species, antioxidants, lipid peroxidation, immunization

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 12. 1. 2009

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 3. 2. 2009
• Vedoucí: MVDr. Mgr. Monika Dušková, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Chemie / Učitelství biologie pro střední školy