Verifikace akreditované analytické metody stanovení triglyceridů druhé generace na biochemickém analyzátoru Advia 1800

Helena JANDOVÁ

Bakalářská práce

The verification of accredited analytical method for the determination of second-generation triglycerides using the biochemical analyzer Advia 1800

Anotace:

Triglyceridy patří do velké skupiny lipidů. Jsou to biologicky velmi významné látky pro lidský organismus. Z chemického hlediska se jedná o glyceroly, na které jsou esterovou vazbou navázány mastné kyseliny. Triglyceridy přijímáme potravou, a aby náš organismus triglyceridy strávil, musí být štěpeny na glycerol a mastné kyseliny,a teprve potom jsou resorbovány a transportovány ke tkáním. Stanovení triglyceridů ze séra, popř. z plazmy, je důležité především v prevenci aterosklerózy, což je nejčastější příčina kardiovaskulárního onemocnění, dále při obezitě nebo diagnostikování diabetu mellitu. Pro zavedení metody stanovení triglyceridů druhé generace na biochemických analyzátorech Advia 1800, na úseku klinické biochemie Centrálních laboratoří Nemocnice Strakonice, a.s., byla potřeba provést verifikaci dané metody. Tato verifikace se řídí požadavky ČSN EN ISO 15189 Zdravotnické laboratoře Zvláštní požadavky na kvalitu a způsobilost, podle které jsou Centrální laboratoře Nemocnice Strakonice, a.s., akreditovány. A dále se řídí Postupem při validaci/verifikaci metody, SOPO-C-06, vypracovaného naší laboratoří. Výsledky verifikace/validace slouží pro hodnocení nejistot měření a ke stanovení návaznosti a porovnatelnosti výsledků měření. Na základě uvedeného dokumentu bylo provedeno měření triglyceridů v séru na dvou biochemických analyzátorech Advia 1800. Tato měření vedla k vyhodnocení preciznosti za podmínek opakovatelnosti, preciznosti za podmínek reprodukovatelnosti a přesnosti. Preciznost za podmínek opakovatelnosti byla proměřována na dvaceti pacientských vzorcích o dvou koncentračních hladinách. Pro hodnocení preciznosti za podmínek reprodukovatelnosti byly použity kontrolní materiály validované v procesu EHK, a to Liquid Assayed Multiqual 1 šarže 45651, druhou kontrolou byla Liquid Assayed Multiqual 2 šarže 45662 od výrobce BIO-RAD. Tyto referenční materiály byly proměřovány každý den v singletu po dobu dvaceti dnů. Ze změřených hodnot byly dopočítány základní statistické parametry a analytický variační koeficient. Pro vyhodnocení pravdivosti byly měřeny kontrolní materiály od firmy SEKK, s.r.o. Na základě těchto měření byly vypočteny opět základní charakteristiky, bias a celková analytická chyba laboratoře. Srovnání této chyby s celkovou maximální chybou doporučenou firmou SEKK, s.r.o. vedlo k vyhodnocení použitelnosti metody pro dané účely.

Abstract:

Triglycerides belong to a large group of lipids. They are biologically very important substances for the human body. Chemically they are glycerols which are bound by ester bonds to fatty acids. Triglycerides are feeding, and that our organism has spend triglycerides must be broken down into glycerol and fatty acids, and then they are absorbed and transported to tissues. Determination of triglycerides in serum, respectively plasma, is particularly important for the prevention of atherosclerosis which is the leading cause of cardiovascular diseases, but also to diagnose and prevent such diseases as obesity or diabetes mellitus. To introduce method for the determination of the second-generation triglycerides via the biochemical analyzers Advia 1800 to be used in the ward of clinical biochemistry of Central Laboratories of Hospital Strakonice, a. s. there was need to carry out a verification of the method. This verification is subject ot the requiremets of ČSN EN ISO 15189 Medical laboratories Special requirements for quality and eligibility, according to which the Central Laboratory of Strakonice Hospital, a s. is accredited. It is further governed by the procedures for the validation/verfication methods, SOPO-C-06, drawn up by our laboratory. The results of the verification/validation are used for the evaluation of measurement uncertainties and to establish continuity and comparability of measurement results. On the basis of document mentioned above, the measurement of triglycerides in serum was conducted in two biochemical analyzers Advia 1800. These measurement led to the evaluation of the precision under repeatability conditions, precisions under conditions of reproductibility and accuracy. Precision under repetability condition was measured at twenty patients' samples in two concentration ranges. For evaluation of precisions under reproducibility conditions we used control materials validated in the EHK processes, exactly Liquid Assayed Multiqual 1 Lot 45651, the second check was with the help of Liquid Assayed Multiqual 2 Lot 45662 from the manufacturer BIO-RAD. These reference materials were measured every day in a singlet for twenty days. From the measured values the basic statistical parameters and analytical coefficient of variation were calculated. To evaluate the truthfulness they were also measured with the help of control materials from the manufacturer SEKK, s. r. o. Based on these measurements the basic characteristics were again calculated together with bias and total laboratory analytical error. Comparison of this error with a maximum mistake reccommended by the company SEKK, s. r. o. led to the evaluation of the method for the present purposes.

Klíčová slova

triglyceridy, lipidy, biochemický analyzátor Advia 1800, spektrofotometrie, validace, verifikace

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 3. 5. 2016

Zveřejnit od: 3. 5. 2016

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Mgr. Eliška Kettnerová

JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH

Zdravotně sociální fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Specializace ve zdravotnictví / Zdravotní laborant