Vplyv IFN-g na primárne bunkové línie synoviocytov a chondrocytov odvodených od pacienta s osteoartrózou

Bc. Dominika FABRICIOVÁ

Diplomová práce

Effect of IFNg on primary synoviocyte and chondrocyte cell lines derived from a patient with osteoarthritis.

Anotace:

Osteoartróza (OA) je komplexné multifaktoriálne ochorenie kĺbov prejavujúce sa pomalou degeneráciou a rozpadom chrupavky. Zápalové procesy nízkeho stupňa prebiehajúce v OA podporujú katabolické procesy v kĺbovej chrupavke a zhoršujú jej nevratné poškodenie. Komplexná sieť cytokínov a chemokínov regulujúcich zápalové reakcie a bunkovú komunikáciu má ústrednú úlohu vo vývoji a progresií OA. Cieľom diplomovej práce bolo detekovať expresiu chemokínového receptora CXCR3 a jeho ligandov CXCL9, CXCL10 a CXCL11 u primárnych chondrocytov a fibroblastoidných synoviálnych buniek (FLS) OA pacientov v odpovedi na koncentračnú radu prozápalového cytokínu IFN-g. Zastúpenie chondrocytov a buniek FLS expremujúcich CXCR3 bolo analyzované pomocou metódy prietokovej cytometrie a výsledky boli navyše overené imunocytochemickým farbením. U chondrocytov bola zistená výrazná produkcia CXCR3 v porovnaní s FLS. Metódou ELISA boli stanovené úrovne expresie chemokínov CXCL9, CXCL10 a CXCL11. Bunky FLS vykazovali výrazne vyššiu expresiu všetkých skúmaných chemokínov oproti chondrocytom. Najvyššia úroveň expresie u oboch typoch buniek bola pozorovaná pri CXCL9. Taktiež bola detekovaná korelácia medzi zastúpením buniek FLS exprimujúcich CXCR3 a úrovňou expresie chemokínov CXCL10 a CXCL11 pri stúpajúcej koncentrácií IFN-g.

Abstract:

Osteoarthritis (OA) is a complex multifactorial joint disease characterized by slow degeneration and breakdown of cartilage. The low-grade inflammatory processes occurring in OA promote catabolic processes in the articular cartilage and aggravate its irreversible damage. A complex network of cytokines and chemokines regulating inflammatory responses and cell communication has a central role in the development and progression of OA. The aim of the thesis was to detect the expression of the chemokine receptor CXCR3 and its ligands CXCL9, CXCL10 and CXCL11 in primary chondrocytes and fibroblast-like synoviocytes (FLS) of OA patients in response to a concentration range of the pro-inflammatory cytokine IFN-g. The representation of chondrocytes and FLS cells expressing CXCR3 was analyzed by flow cytometry and the results were additionally verified by immunocytochemical staining. Significantly higher production of CXCR3 was detected in chondrocytes compared to FLS. The expression levels of chemokines CXCL9, CXCL10 and CXCL11 were determined by the ELISA method. FLS cells showed significantly higher expression of all investigated chemokines compared to chondrocytes. The highest level of expression in both cell types was observed for CXCL9. A significant correlation was also detected between the representation of FLS cells expressing CXCR3 and the expression level of chemokines CXCL10 and CXCL11 with increasing concentration of IFN-g.

Klíčová slova

osteoartróza, IFN-g, chondrocyty, bunky FLS, CXCR3, CXCL9, CXCL10, CXCL11

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 30. 4. 2024

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Mgr. Zuzana Mikulková, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Molekulární a buněčná biologie / Molekulární a buněčná biologie