Molekulární detekce vybraných bodových mutací odpovědných za rezistenci k pyrethroidům v genu pro sodíkový kanál kleštíka včelího (Varroa destructor)

Bc. Kateřina LAHNEROVÁ

Master's thesis

Molecular detection of selected point mutations associated with pyrethroids resistance in sodium channel gene in mite Varroa destructor

Abstract:

Cílem diplomové práce je navrhnout a optimalizovat diagnostickou metodu, kterou by bylo možné detekovat přítomnost bodových mutací nukleotidů 1710 a 1712 ve VmNa genu pro napěťově řízený sodíkový kanál kleštíka včelího (Varroa destructor), které vedou k aminokyselinovým substitucím na pozici 925 a způsobují tak rezistenci tohoto parazita k přípravkům obsahujícím tau-fluvalinát. Teoretická část práce je zaměřena na biologii kleštíka včelího, mechanismy vzniku rezistence roztočů, varroacidní látky a na metody sloužící k molekulární detekci rezistence roztočů. V rámci experimentální části práce byla vytvořena a zoptimalizována Tříprimerová alelicky specifická PCR (3-PAS-PCR) diagnostická metoda umožňující snadnou a spolehlivou detekci wild-type a všech mutantních genotypů, které byly doposud identifikovány ve vztahu k rezistenci kleštíka k tau-fluvalinátu.

Abstract:

The purpose of this master thesis is to design and optimize a diagnostic method which could be used for detection of point mutations of nucleotides 1710 and 1712 in Varroa destructor voltage-gated sodium channel gene (VmNa) which lead to amino acid substitutions at position 925 and so they are responsible for Varroa tau-fluvalinate resistance. The theoretical part is devoted to a biology of Varroa mite, to resistance mechanisms, varroacid substances and to diagnostic methods for mite resistance detection. In the experimental part Three primered allele specific PCR (3-PAS-PCR) diagnostic method was created and optimalized, this method enables a basic and reliable detection of wild-type and all mutant genotypes which were identified in relation to Varroa tau-fluvalinate resistance.

Keywords

bodové mutace, kleštík včelí (Varroa destructor), včela medonosná (Apis mellifera), polymerázová řetězová reakce, rezistence, tau-fluvalinát, Tříprimerová alelicky specifická PCR (3-PAS-PCR)

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 30. 4. 2019

Thesis defence

• Supervisor: RNDr. Petr Nádvorník, Ph.D.

Palacký University Olomouc

Faculty of Science

Master programme / field:
Biology / Molecular and Cell Biology