Adaptivní plasticita a její vliv na chemoterapii neuroblastomu

Bc. Martina Karasová

Master's thesis

Adaptive plasticity and its effect on neuroblastoma chemotherapy

Abstract:

V této diplomové práci se věnujeme vlivu inhibice kinázy Akt a současně OXPHOS na počet živých buněk linií neuroblastomu SK-N-(BE)2 a SH-SY5Y. Kináza Akt přispívá k proliferaci buněk, potlačování apoptózy a k přežívání za nepříznivých podmínek. Je hlavním regulátorem energetického metabolismu a její inhibice, společně s inhibicí mitochondriální respirace, je slibný nástroj protinádorové terapie. My jsme zkoumali spolupůsobení vybraných alosterických inhibitorů kinázy Akt (Akt1/2inhibitor, MK2206) a mitochondriálních inhibitorů (tetrathiomolybdát, rotenon) na tradičních 2D kulturách i 3D sféroidech s cílem popsat mechanismus tohoto spolupůsobení a srovnat tradiční 2D modely s 3D modely více odrážející skutečné in vivo podmínky. Prokázali jsme synergické působení inhibitorů kinázy Akt a OXPHOS na snižování počtu živých buněk. K žádanému efektu, tj. snížení počtu živých buněk, tak stačí nižší dávka chemikálií ve vhodné kombinaci

Abstract:

The aim of this thesis is to clarify the effect of the Akt kinase inhibition occuring simultaneously with inhibition of OXPHOS on viability of neuroblastoma cell SK-N-(BE)2 and SH-SY5Y. The Akt kinase promotes cell proliferation, inhibits apoptosis and contributes to survival of cells in hostile conditions. It is the main regulator of energetic metabolism. Its inhibition together with the inhibition of mitochondrial respiration are promising tools in anticancer therapy. We tested collective influence of selected allosteric Akt kinase inhibitors (Akt1/2inhibitor, MK2206) and mitochondrial inhibitors (tetrathiomolybdate, rotenone) on the cells cultivated in traditional 2D monolayers and 3D spheroids with the aim to describe the mechanism of this cooperation and to compare traditional 2D model with 3D models, which reflect more exactly the conditions in vivo. We prove the synergistic effect of Akt kinase inhibition and inhibition of OXPHOS on reduction of cell viability. To reach this effect, the lower dosage of chemotherapeutics in a suitable combination is sufficient.

Keywords

Neuroblastom, adaptivní plasticita, energetický metabolismus, kináza Akt, mitochondriální inhibitory

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 5. 5. 2016

Thesis defence

• Date of defence: 7. 6. 2016
• Supervisor: Mgr. Jarmila Navrátilová, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / field:
Experimental Biology / Molecular Biology and Genetics