Studium vybraných miRNA jako terapeutických cílů u uroteliálního karcinomu močového měchýře

Bc. Mária Venghová

Master's thesis

Study of selected miRNAs as potential therapeutic targets in urothelial carcinoma of bladder

Abstract:

Karcinom močového měchýře patří mezi nádorová onemocnění s vysokou prevalencí, zejména v průmyslových zemích, což je důsledkem působení etiologických faktorů jako kouření, či práce v textilním, chemickém nebo gumárenském průmyslu. Asi u 80 % nádorů močového měchýře se jedná o povrchové formy, z nichž většina recidivuje do 5 let od první resekce. I z tohoto důvodu je nezbytné hledat nové molekulární markery zapojené do patofyziologie uroteliálního karcinomu močového měchýře (UKMM) využitelné v cílené terapii, která by nahrazovala současnou cytotoxickou systémovou léčbu. MikroRNA (miRNA) jsou skupinou krátkých nekódujících RNA, hrajících významnou roli v buněčných procesech. Mnoho prací poukazuje na význam miRNA v molekulární patologii nádorových onemocnění a na jejich potenciál jako diagnostických, prognostických, či terapeutických markerů u karcinomu močového měchýře. V této práci je provedena analýza exprese supresorové miR-23b u vzorků nádorové a nenádorové tkáně a následná korelace s klinicko-patologickými údaji (celkové přežívání, doba do recidivy onemocnění). Je pozorovaná významně snížená hladina exprese v nádorové tkáni v porovnání s kontrolní tkání. Role miR-23b byla také analyzovaná funkčně na stabilních buněčných liniích karcinomu močového měchýře T-24 a 5637. Po transfekci buněk prekurzorem příslušné miRNA byla zjištěna snížená viabilita, proliferace, migrace a klonogenicita u buněčné linie invazivního karcinomu močového měchýře (T-24), avšak vliv na buněčný cyklus a apoptózu se nepotvrdil. Buněčná linie neinvazivního karcinomu (5637) nebyla významně ovlivněná navýšenou hladinou miR-23b ani u jedného z funkčních in vitro testů.

Abstract:

Bladder cancer (BC) is a cancer disease with high prevalence, mainly in industrial countries, which is a consequence of exposure to etiological factors as smoking or work in textile, chemical or rubber industry. Approximately 80% tumours are of papillary origin with 5 years relapse after first resection. That is also a reason to search for new molecules that are involved in pathophysiology of BC and could be useful in a targeted therapy, which could replace a recent cytotoxic therapy. MicroRNAs (miRNAs) are a group of short non-coding RNAs that play an important role in cell processes. Many studies show an importance of miRNAs in molecular pathology of tumorous diseases and their potential as a diagnostic, prognostic and therapeutic markers in bladder cancer. In this thesis, suppressive role of miR-23b in vitro and its expression alternations in native tumour tissue are analysed. All the data are subsequently correlated with overall survival and time to relapse. We observe significantly lower level of expression in tumour tissues in comparison with non-tumour tissues. MiR-23b is also functionally analysed on stable cell lines of BC, T-24 and 5637. After transfection with precursor, decrease in viability, proliferation, migration, clonogenicity was revealed in muscle invasive bladder cancer (MIBC) (T-24), however the effect of miR-23b on cell cycle and apoptosis was not confirmed. Non-muscle invasive bladder cancer cell line (NMIBC) (5637) was not influenced by up-regulated expression of miR-23b in any in vitro tests.

Keywords

mikroRNA, miR-23b, pre-miR-23b, uroteliální karcinom močového měchýře, transfekce, microRNA, urothelial bladder cancer, transfection

Language used: English

Date on which the thesis was submitted / produced: 16. 5. 2016

Thesis defence

• Date of defence: 2. 6. 2016
• Supervisor: doc. RNDr. Ondřej Slabý, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / field:
Biochemistry / Analytical Biochemistry