Enterální výživa jako růstové médium pro střevní bakterie

Bc. Monika Štemberková

Master's thesis

Enteral feeding as a growth medium for intestinal bacteria

Abstract:

Cílem této diplomové práce bylo testovat růst střevních bakterií v enterální výživě a enterální výživě s lysozymem. Hypotézou bylo, že enterální výživy budou působit jako prebiotika tzn. podporovat růst probiotických bakterií, zatímco potenciálně patogenní mikroorganismy budou potlačeny. Enterální výživa s lysozymem bude inhibovat růst klostridií. Střevní mikrobiota je složitý ekosystém, který je důležitý v homeostáze gastrointestinálního traktu. Probiotika jsou živé mikroorganismy, které při konzumaci v dostatečném množství, mají prospěšný účinek na zdraví hostitele. Prebiotika jsou nestravitelné složky potravin, které pozitivně ovlivňují zdraví člověka, podporují růst probiotických mikroorganismů. Enterální výživa je používána pro navození remise u léčby Crohnovy choroby. Crohnova choroba je chronické zánětlivé onemocnění střev. Lysozym je antimikrobiální enzym, hydrolyticky štěpí glykosidickou vazbu N-acetylmuramové kyseliny a N-acetylglukosaminu v buněčné stěně bakterií. Testování růstu střevních bakterií bylo prováděno v mikrotitrační destičce. Do 0,09 ml enterální výživy, enterální výživy s lysozymem nebo W-Ch bujónu bylo napipetováno 0,01 ml naředěných bakterií. Mikrotitrační destička byla kultivována anaerobně po dobu 24 hodin, při teplotě 37 °C. Po 24 hodinách byly bakterie naočkovány do Petriho misek s Wilkins-Chalgren agarem se sójovým peptonem. Misky byly kultivovány po dobu 48 hodin za anaerobních podmínek. Escherichia coli byla očkována do Petriho misek na agar a kultivována po dobu 24 hodin při 37 °C. Narostlé kolonie byly přepočítány na log KTJ/g a hodnoty byly statisticky vyhodnoceny. V nejnižších počtech roste v enterálních výživách s lysozymem i bez lysozymu B. animalis subsp. lactis (DAN a BB12). V enterálních výživách nejlépe rostly bakterie rodu Escherichia. V enterálních výživách s lysozymem nejlépe rostly bakterie rodu Lactobacillus. Ve Wilkins-Chalgren bujónu nejlépe rostly bakterie rodu Escherichia. Přídavek lysozymu (100 mg/l) neinhibuje růstu bakterií. Na závěr lze konstatovat, že enterální výživy nevykazovaly prebiotický účinek.

Abstract:

The aim of master´s thesis was to test the growth of intestinal bacteria in enteral feeding and enteral feeding with lysosyme. The hypothesis was that enteral feeding will act as a prebiotics, supporting the growth of probiotics bacteria while potentially pathoghenic microorganisms will be suppressed. Enteral feeding with lysosyme will inhibit the growth of clostridia. Intestinal microbiota is complex ecosystem that is important in the homeostasis of the gastrointestinal tract. Probiotics are live microorganisms which they have beneficial effect on the host health. Prebiotics are indigestable components of foods that positively affect on human health. Prebiotics selectively stimulate the growth probiotic microorganisms. Enteral feeding is indicated for the inducing remission of patiens with Crohn´s disease. Crohn´s disease is chronic inflammatory bowel disease. Lysosyme is an antimicrobial enzyme that hydrolyses linkage between N-acetylmuramic acid and N-acetylglukosamine in bacterial cell wall. The growth of intestinal bacteria was tested in the microtitre plates. Enteral feeding, enteral feeding with lysozyme, Wilkins-Chalgren broth (0,09 ml) was inoculated with 0,01 ml suspension of bacteria. The microtitre plate was incubated in anaerobic condition at 37 °C for 24 hours. After 24 hours bacteria were inuculated to the Petri dishes containing Wilkins-Chalgren agar with soya peptone. Petri dishes were cultivated anaerobically at 37 °C for 48 hours. Escherichia coli was cultivated aerobically at 37 °C for 24 hours. Number of bacteria was expressed in log CFU/g and was statisticaly analysed. The strains of Bifidobacterium animalis subsp. lactis (DAN and BB12) had the lowest growth in enteral feeding with and without lysosyme. The strains of Escherichia coli had the highest growth in enteral feeding. Lactobacilli had the highest growth in enteral feeding with lysosyme. E. coli had the highest growth in Wilkins-Chalgren broth. The lysosyme (100 mg/l) doesn´t inhibit the growth of bacteria. It could be concluded that enteral feedings seems not to be prebiotics.

Keywords

enterální výživa, lysozym, střevní bakterie, bifidobakterie, klostridie

Keywords

bifidobacteria, clostridia, enteral feeding, lysosyme, intestinal bacteria

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 7. 4. 2017

Thesis defence

• Supervisor: prof. Ing. Vojtěch Rada, CSc.

Czech University of Life Sciences Prague

Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources

Master programme / field:
Nutrition and Foodstuffs / Nutrition and Foodstuffs