Detekce alely HLA-B27 pomocí komerční soupravy

Simona VOLKOVÁ

Bachelor's thesis

Detection of the HLA-B27 allele using a commercial kit

Abstract:

Hlavním tématem předkládané práce je detekce alely HLA-B27 pomocí komerčně dodávaného kitu od firmy BAG HEALTH CARE. Molekula HLA-B27 bývá spojována s některými onemocněními. Nejznámější je asociace s ankylozující spondylitidou neboli Bechtěrevovou chorobou. Ankylozující spondylitida je celoživotní onemocnění, projevující se zánětlivou reakcí hlavně v místě obratlů páteře a velkých kloubů jako kyčle, ramena a kolena. Díky asociaci je možné detekci alely HLA-B27 využít jako molekulární marker pro včasnou diagnózu, zmírnění následků a zlepšení průběhu léčby ankylozující spondylitidy. V teoretické části práce je specifikována ankylozující spondylitida a hlavní histokompatibilní komplex s důrazem na klíčovou molekulu HLA-B27. Praktická část bakalářské práce je zaměřena na sběr vzorků, izolaci DNA a amplifikaci DNA. Následovanou částí samotné laboratorní detekce alely HLA-B27 pomocí komerčního kitu s využitím gelové elektroforézy pro vizualizaci DNA fragmentů. Takto bylo vyšetřeno 20 anonymizovaných vzorků DNA od dobrovolníků. Z 20 vyšetřovaných vzorků, se pozitivita na alelu HLA-B27 prokázala u 6 vzorků dobrovolníků, kteří měli různé klinické projevy Bechtěrevovy choroby.

Abstract:

The main topic of the presented work is the detection of the HLA-B27 allele using a commercially available kit from the company BAG HEALTH CARE. The HLA-B27 molecule has been linked to some diseases. The best known is the association with ankylosing spondylitis or Bechterew's disease. Ankylosing spondylitis is a lifelong disease, manifested by an inflammatory reaction mainly at the site of the vertebrae of the spine and large joints such as the hips, shoulders and knees. Thanks to the association, the detection of the HLA-B27 allele can be used as a molecular marker for early diagnosis, mitigation and improvement of the course of treatment of ankylosing spondylitis. The theoretical part of the thesis specifies ankylosing spondylitis and the main histocompatibility complex with emphasis on the key molecule HLA-B27. The practical part of the bachelor thesis is focused on sample collection, DNA isolation and DNA amplification. This is followed by the laboratory detection of the HLA-B27 allele itself using a commercial kit using gel electrophoresis to visualize DNA fragments. Thus, 20 anonymized DNA samples from volunteers were examined. Of the 20 samples examined, positivity for the HLA-B27 allele was demonstrated in 6 samples of volunteers who had different clinical manifestations of Bechterew's disease.

Keywords

ankylozující spondylitida, Bechtěrevova choroba, HLA-B27, DNA, gelová elektroforéza

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 3. 5. 2022

Thesis defence

• Supervisor: Ing. Tomáš Nix, Ph.D.

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Sciences

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Health Technician