Antiradikálová aktivita kvercetinu a jeho glykosidů v biologickém systému

Denisa GERHARDOVÁ

Bachelor's thesis

Antiradical activity of quercetin and its glycosides in biological system

Anotácia:

Tato práce se zabývá srovnáním antiradikálové aktivity čtyř flavonoidů, kvercetinu, taxifolinu (dihydrokvercetin), rutinu (kvercetin-3-O-rutinosid) a isokvercitrinu (kvercetin-3-O-glukosid). Byla porovnávána schopnost vychytávat superoxidový radikál produkovaný v diferencovaných buňkách HL-60 fagocytovou NADPH-oxidasou aktivovanou forbolovým esterem. Buňky HL-60 diferencují vlivem dimethylsulfoxidu na buňky podobné neutrofilům, což je doprovázeno expresí NADPH-oxidasy. Její funkčnost byla ověřena chemiluminiscenční metodou. Antiradikálová aktivita testovaných látek byla hodnocena jako schopnost potlačit redukci cytochromu c superoxidovým radikálem. Bylo zjištěno, že tato schopnost je ovlivněna jak koncentrací, tak fyzikálně-chemickými vlastnostmi flavonoidů. Při nižší testované koncentraci byl nejúčinnějším vychytávačem superoxidového radikálu taxifolin, méně účinné byly glykosidy rutin a isokvercitrin a nejméně účinný byl kvercetin. Při vyšší koncentraci byl naopak nejúčinnější kvercetin. Případná cytotoxicita látek vůči diferencovaným buňkám HL-60 byla vyloučena na základě analýzy buněčného cyklu (sub-G1 DNA) a mitochondriálního membránového potenciálu průtokovou cytometrií. Z provedené studie vyplývá, že testované flavonoidy mohou při netoxických koncentracích vychytávat superoxidový radikál produkovaný aktivovanými neutrofily.

Abstract:

The aim of this thesis was to compare antiradical activity of four flavonoids, quercetin, taxifolin (dihydroquercetin), rutin (quercetin-3-O-rutinoside) and isoquercitrin (quercetin-3-O-glucoside). The study examined the ability of tested comounds to scavenge superoxide radical produced by differentiated HL-60 cells via phagocyte NADPH oxidase activated by phorbol ester. HL-60 cells differentiate in response to dimethyl sulfoxide into neutrophil-like cells and this process is accompanied by induction of NADPH oxidase. The functionality of NADPH oxidase was verified by the chemiluminescent method. Antiradical activity was evaluated as the ability to suppress reduction of cytochrome c by superoxide radical. The antiradical activity of tested compounds was found to depend on their concentration and physico-chemical properties. At low concentrations, taxifolin was the most efficient superoxide radical scavenger, glycosides rutin and isoquercitrin were less efficient and the least efficient flavonoid was quercetin. On the other hand, at the highest test concentration quercetin appeared to be the most efficient superoxide scavenger. Possible cytotoxicity of tested compounds in differentiated HL-60 cells was ruled out by flow cytometric analysis of the cell cycle (sub-G1 DNA) and mitochondrial membrane potential. It is concluded that the tested flavonoids at noncytotoxic concentrations may scavenge superoxide radical produced by activated neutrophils.

Kľúčové slová

kvercetin, glykosidy, taxifolin, antiradikálová aktivita, oxidativní vzplanutí, toxicita

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 10. 5. 2012

Zverejniť od: 10. 5. 2012

Obhajoba závěrečné práce

• Vedúci: Mgr. Jiří Vrba, Ph.D.

PALACKÝ UNIVERSITY IN OLOMOUC

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Biochemistry / Biochemistry