Možnosti využití suspenzní kultivace savčích buněčných linií na syntetických mikronosičích v bioreaktoru

Bc. Sabina Hřibová

Diplomová práce

Possibilities of using suspension culture of mammalian cell lines on synthetic microcarriers in a bioreactor

Anotace:

Kultivace velkého množství savčích buněk, mimo jiné potřebných pro výrobu virových vakcín, je často ztížena jejich potřebou adheze k povrchu. Tento problém řeší mikronosiče, které umožňují kultivovat tyto buňky výhodněji formou suspenze. Tato práce se zabývá optimalizací kultivačních podmínek savčí buněčné linie MDBK na syntetických mikronosičích Cytodex 3. Stabilních výsledků a vysokých výtěžků (7,1 × 10^5 buněk/ml) bylo dosaženo s koncentrací mikronosičů 2 g/l a velikostí inokula 24 buněk na mikronosič. Po zavedení kultivace v laboratorním měřítku byla kultivace převedena do bioreaktoru o objemu 1-3 l. Získané buňky byly infikovány bovinním respiratorním syncytiálním virem, přičemž bylo dosaženo virového titru 4,8 log10TCID50/ml.

Abstract:

The cultivation of large numbers of mammalian cells, including those needed to produce viral vaccines, is often hampered by their need for adhesion to surfaces. This problem is solved by microcarriers that allow these cells to be cultured more conveniently in suspension. This work focuses on the optimization of culture conditions of the mammalian cell line MDBK on synthetic Cytodex 3 microcarriers. Stable results and high yields (7.1 × 10^5 cells/ml) were achieved with a microcarrier concentration of 2 g/l and an inoculum size of 24 cells per microcarrier. After the establishment of laboratory-scale cultivation, the culture was transferred to a 1-3 l bioreactor. The obtained cells were infected with bovine respiratory syncytial virus, achieving a viral titer of 4.8 log10TCID50/ml.

Klíčová slova

bioreaktor, bovinní respiratorní syncytiální virus, MDBK linie, mikronosič, savčí buněčné linie, suspenzní kultivace, bioreactor, bovine respiratory syncytial virus, mammalian cell lines, MDBK cell line, microcarrier, suspension cultivation

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 18. 5. 2022

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 15. 6. 2022
• Vedoucí: doc. Ing. Martin Mandl, CSc.
• Oponent: Mgr. Martin Tkáč

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biotechnologie / Biotechnologie