Syntéza a charakterizace dendrimer-proteinových konjugátů s biorekogniční schopností pro aplikaci v biomedicíně

Tereza KNAPOVÁ

Diplomová práce

Synthesis and characterization of dendrimer-protein conjugates with bio-recognition function for biomedical applications

Anotace:

Dendrimery (DDM) představují nanomateriály s širokým uplatněním v biomedicínských a bioanalytických aplikacích. V poslední době jsou centrem dění nanomateriály schopné specifické vazby, např. k označení určitých biomolekul pro konkrétní detekci nebo k efektivnějšímu přenosu léčiv. Zde je představen nový plán přípravy hybridních dendrimer-proteinových nanokompozitních materiálů se selektivní biorekogniční schopností. Základem postupu je aplikace rekombinantních proteinových bází na albumin-vázající doménu proteinu G (Streptococcus G148), který může nahradit tradiční vaznou komponentu za jiný antigen (ligand). Tato syntéza byla tvořena díky orientované streptavidin-ABD-WT-proteinové vazbě na biotinem značené PAMAM dendrimery a následně na molekuly lidského albuminového séra (HSA). Konjugáty a jejich vazebné vlastnosti byly ověřeny pomocí metod HPLC, elektroforézy, AFM a DLS. Tento obecný postup může být vhodný pro různé typy dendrimerů, které jsou využitelné v biomedicínských a bioanalytických oblastech.

Abstract:

Dendrimers (DDMs) represent nanomaterials with wide range of biomedical and bioanalytical applications. Recently the synthesis of nanomaterials which would possess an ability to bind to specific biological targets for enhancing the site-specific drug delivery or to label a certain biomolecules for their specific detction is in focus. Here it presents a novel strategy for preparation of hybrid dendrimer-protein nanomaterials with selective biorecognition properties. The core of this approach is an application of recombinant proteins based on albumin-binding domain (ABD) of protein G (Streptococcus G148) which can replace the traditional antibodies as ligand molecules. It has demonstrated this novel approach by oriented coupling of streptavidin-ABD-WT fusion proteins on biotin labels PAMAM DDMs and the subsequent selectvie binding of human-serum albumin (HSA) molecules. The successful formation of conjugates and their binding properties were confirmed by HPLC, electrophoresis, AFM and DLS. This general approach can be adapted to various type sof DDMs and molecular targets which predispose i tis applications in wide range of bionedical and bioanalytical fields.

Klíčová slova

Dendimer, biomedicínské, bioanalytické aplikace, protein, AFM, elektroforéza, HPLC, DLS

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 30. 4. 2014

Zveřejnit od: 31. 12. 2999

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Mgr. Jan Malý, Ph.D.

UNIVERZITA JANA EVANGELISTY PURKYNĚ V ÚSTÍ NAD LABEM

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Nanotechnologie / Aplikované nanotechnologie