Testy vitality in vitro kultivovaných buněk

Bc. Nikol NOHELOVÁ

Master's thesis

Viability assays of in vitro cultured cells

Abstract:

Buněčné kultury jsou jedním z hlavních nástrojů používaných v buněčné a molekulární biologii, proto se teoretická část práce zaměřuje na zdroj buněk, jejich kultivaci a metody hodnocení jejich vitality in vitro. V posledních letech je hojně zkoumána cytotoxicita nanočástic (NPs), široce využívaných v průmyslu. Charakteristikou nanočástic s příklady studií in vitro cytotoxicity u buněčné kultury lidského adenokarcinomu A549, se zabývá další část teoretického přehledu. Praktická část je zaměřena na osvojení si metodiky správné kultivace A549 a posouzení účinku dvou vzorků kompozitů nanočástic titanu na viabilitu buněk v kultivačním médiu bez séra a se sérem pomocí MTT testu. Po 24 hodinách výsledky naznačují nepatrně zvýšenou viabilitu v médiu se sérem, výsledky však nejsou jednoznačné. Vyšší viabilita by korespondovala s protektivním účinkem séra a jeho nutriční funkcí. Po 48 hodinách výsledky naznačují podobnou či nepatrně zvýšenou viabilitu v médiu bez séra. Nicméně se zdá, že přítomnost séra v médiu po 48 hodinách působení viabilitu buněk oproti médiu bez séra příliš neovlivnila.

Abstract:

Cell culture is one of the major tools used in cellular and molecular biology and therefore, theoretical part is focused on cell culture source, cultivation and their vitality assays in vitro. In recent years, the cytotoxicity of nanoparticles, widely used in industry, is being studied extensively. Characterization of nanoparticles with examples of cytotoxicity studies on human lung adenocarcinoma cell line A549 is the other part of the theoretical overview. The aim of experimental part is study proper techniques of the cultivation procedure of A549 and investigate effect of two types of compounds of titanium nanoparticles on cell viability in medium with serum and serum-free medium by MTT assay. After 24 hours, the results suggest a slightly increased viability in medium with serum, which may indicate its protection effect and function as a nutrition component. After 48 hours, the results indicate a slightly increased viability in serum-free medium. However, it appears that the cell viability did not be influenced by presence of serum compared with serum containing medium after 48 hours of exposure.

Keywords

buněčná kultura, A549, cytotoxicita, viabilita, MTT, nanočástice

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 23. 4. 2018

Thesis defence

• Date of defence: 15. 5. 2018
• Supervisor: Mgr. Zuzana Rybková, Ph.D.

University of Ostrava

Faculty of Science

Master programme / field:
Biology / Experimental Biology