Mikropropagace listoklasce (Phyllostachys) v podmínkách in-vitro

Martina Kadavá

Master's thesis

Micropropagation of Phyllostachys in condition in-vitro

Abstract:

Tato práce se věnuje mikropropagaci vybraných druhů rodu Phyllostachys v kulturách in-vitro. Cílem je testování účinnosti sterilizace, ovlivnění multiplikace různými růstovými látkami, složení zakořeňovacích médií a jejich vliv na výsledný růst preparátů. Hypotézou je zvýšení počtu výhonů díky dodáním cytokininů do plného MS (Murashige a Skoog) média (BAP - benzylaminopurin, TDZ - thidiazuron), případně v kombinaci s auxiny do média ve fázi multiplikace a tím i zvýšení množitelského koeficientu u sledovaných rostlin. Pro in-vitro propagaci byl zvolen odběr nodálních segmentů z rostlin izolovaných ve skleníku. Po následné sterilizaci byly explantáty umístěny do plného MS multiplikačního média s obsahem různých koncentrací cytokininů, případně auxinů. Z hlediska průměrného počtu výhonů statisticky nejlepších výsledků dosahovaly koncentrace cytokininů BAP (5mg.l-1) a TDZ (2 mg.l-1). Cílem bylo též testování účinnosti sterilizace. Testován byl Chlornan sodný ve 3 různých koncentracích působící různou dobu. Statisticky nejlepších výsledků v poměru kontaminace a následné regenerace dosahoval chlornan sodný v koncentraci 0,47 % působící po dobu 10 minut a po dobu 20 minut. Různé varianty složení zakořeňovacích médií se ukázaly být nedostatečné, protože se ani v jedné variantě nepodařilo iniciovat tvorbu kořenů. Byla zvolena média, která podle vědeckých článků měla úspěšnost zakořenění u podčeledi Bambusoideae až 90% úspěšnost. K zakořeňování in-vitro byly použity regulátory NAA (5 mg.l-1), IBA (10 - 20 mg.l-1), Coumarin (40 - 80 mg.l-1), IAA (5 mg.l-1) a NAA (5 mg.l-1). Část prýtů bylo převedeno ex vivo do pěstebního substrátu. Žádná z použitých variant však nevedla k docílení zakořenění.

Abstract:

This paper focuses on the micropropagation of selected species of the genus Phyllostachys in in-vitro cultures. The goal was to test the efficiency of sterilization, influencing the multiplication through various growth substances and the composition of rooting media, and their final effect on the specimens' growth. The hypothesis being tested is that an increase in the number of shoots can be attained through the introduction of cytokinins into the complete MS (BAP - benzylaminopurine, TDZ -- thidiazurone) medium, optionally combining this with the addition of auxins in the multiplication phase, which would lead to the increase of the mutiplication coefficient of selected plants. The in-vitro propagation was tested on nodal segments of plants isolated in greenhouses. After their sterilization, the explantates were placed into full MS multiplication medium with various concentration of cytokinins and optionally, auxins. As far as the average number of shoots is concerned, the BAP (5 mg.l-1) a TDZ (2 mg.l-1) cytokinins proved to be the most successful. The secondary goal was the testing of the efficiency of sterilization. The target, sodium hypochlorite, was tested in three different concentrations, each acting for various times. Statistically, the most favorable result in the ratio of contamination and subsequent regeneration was reached with sodium hypochlorite in 0.47% concentration, acting either for for 10 or 20 minutes. Different composition variants of of the rooting media were shown to be insufficient, as none of them managed to initiate the rooting process. The media chosen were quoted to have the rooting success rates of up to 90% with the subfamily Bambusoideae, according to science journals. For in-vitro rooting, the regulators used were: NAA (5 mg.l-1), IBA (10 - 20 mg.l-1), Coumarin (40 - 80 mg.l-1), IAA (5 mg.l-1), and NAA (5 mg.l-1). A portion of the shoots was transferred into the growth substrate ex-vivo. None of the variants led to a successful rooting, however.

Keywords

Phyllostachys, in vitro propagace, růstové látky, kultivační médium, sterilizace, listoklasec

Keywords

in-vitro propagation, cultivation medium, phyllostachys, growth stimuli, sterilization

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 10. 4. 2015

Thesis defence

• Supervisor: Ing. Pavel Matiska, Ph.D.

Czech University of Life Sciences Prague

Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources

Master programme / field:
Horticulture / Market Horticulture