Využití bioluminiscenčních, histologických a imunohistochemických technik při studiu lokalizace produktů genové exprese v tkáních hmyzu

Lucie PAUCHOVÁ

Bachelor's thesis

Anotácia:

Reportérovými geny běžně užívanými v molekulární biologii jsou geny enzymů katalyzující bioluminiscenční reakce. Tyto genové markery se uplatňují zejména při studiu oscilace genových produktů v centrálním oscilátoru cirkadiánních hodin. Tato práce zdokonalila techniku, pomocí které lze sledovat změnu exprese cirkadiánního genu period na úrovni jednoho neuronu v mozku Drosophila melanogaster, využitím bioluminiscenčních markerů. Kromě toho byla práce zaměřena na lokalizaci nově identifikovaného neuropeptidu TEFLa v různých vývojových stádiích ploštice Pyrrhocoris apterus. Tento neuropeptid byl detekován v mozcích nymf i dospělců, v posteriorní části středního střeva dospělců a v gonádách larev. U embryí byl nalezen v oblasti okrajů uzavírajícího se amnionového obalu. Syntéza TEFLa neuropeptidu ve střevě dospělců je kontrolována cirkadiánními rytmy. Zjištění distribuce tohoto peptidu je prvním krokem ke specifikaci jeho funkce.

Abstract:

The genes of enzymes catalyzing the bioluminescence reactions are commonly used as reporter genes in molecular biology. These markers are applied especially, in the studies of daily oscillation of gene expression products involved in the circadian clock. Here is reported an improved technique for monitoring the clock gene expression on the single neuron level in the brain of Drosophila melanogaster by using the bioluminescence marker. A part from that another study is focused on localizing a newly identified neuropeptide TEFLa in different developmental stages of firebug Pyrrhocoris apterus. This neuropeptide was detected in the brain of larvae and adults, in the posterior region of the midgut of adults and in the gonades of larvae. Beside that, it was found in the region of amnion closure in embryos. Synthesis of TEFLa in the adults' gut is controlled by the circadian rhythms. Identification of TEFLa distribution helps to uncover the function of this neuropeptide.

Kľúčové slová

bioluminiscence, bioluminiscenční genové markery, LuminoView 200, Drosophila melanogaster, imunohistochemie, neuropeptid, Pyrrhocoris apterus

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 17. 4. 2019

Obhajoba závěrečné práce

• Vedúci: Mgr. Hana Sehadová, Ph.D.

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Biology / Biomedical Laboratory Techniques