Detekce lysozymu v tělních tekutinách

Bc. Tereza Kvasničková

Master's thesis

Measuring of lysozyme in body fluids

Anotácia:

Lysozym je enzym a humorální faktor nespecifické imunity, který je široce zastoupený u organismů. Tato diplomová práce se zabývá pouze lysozymem přítomným v lidských tělních tekutinách. Teoretická část shrnuje aktuální informace o enzymu a podrobnou rešerši literárních údajů o koncentracích v různých tělních tekutinách, konkrétně v mg/l: v lidských slzách (1 100; 1 678; 1 768), slinách (0,05164; 4,35; 3,5 až 9,5), krvi (4,73; <10,2; 13,196; 2,9 až 15,2; 17,5), moči (0,08 až 0,13), mateřském mléce (300 až 400; 420), plodové vodě (19,1) a v nosním sekretu (122,9; 177,7). V literatuře jsou také prokázány změny hladiny lysozymu u celé řady onemocnění (např. u nádorových onemocnění, vysokého krevního tlaku, Crohnovy choroby, Alzheimerovy choroby, pneumonie, onemocnění jater nebo vylučovací soustavy) a rovněž u sportovců po zátěži. V rámci experimentální části práce byly optimalizovány metody (turbidimetrie a radiální difúze) k detekci lysozymu v lidských tělních tekutinách, přičemž turbidimetrické stanovení se ukázalo jako vhodnější metoda. Na souboru vzorků slin a krevní plazmy od sportovců byly zjištěny statisticky významné rozdíly v průměrném obsahu lysozymu před a po zátěži (v krevní plazmě: 14,1 a 37,8 mg/l), koncentraci celkového proteinu (ve slinách: 2 258,8 a 4 704,8 mg/l i krevní plazmě: 89 848,2 a 80 102,7 mg/l) a lysozymu přepočteného na gram proteinu (ve slinách: 3,5 a 0,9 mg/g i krevní plazmě: 0,2 a 0,5 mg/g).

Abstract:

Lysozyme is an enzyme and a humoral factor of the non-specific immunity which is widely present in organisms. This diploma thesis deals only with lysozyme present in human body fluids. The theoretical part summarizes current information about the enzyme and reports a detailed search of literature data of concentrations in various body fluids, specifically in mg/l: in human tears (1 100; 1 678; 1 768), saliva (0,05164; 4,35; 3,5 to 9,5), blood (4,73; <10,2; 13,196; 2,9 to 15,2; 17,5), urine (0,08 to 0,13), breast milk (300 to 400; 420), amniotic fluid (19,1) and nasal secretions (122,9; 177,7). Changes in lysozyme levels have also been established in the literature in a variety of diseases (e.g. cancer, high blood pressure, Crohn's disease, Alzheimer disease, pneumonia, liver disease or the excretory sys-tém disease) and as well as in athletes after exercise. In the experimental part of the work were optimized methods (turbidimetry and radial diffusion) for the detection of lysozyme in human body fluids. Turbidimetric determination turned out more suitable met-hod. Statistically significant differences in lysozyme average content were found out on a set of saliva and blood plasma samples from athletes taken before and after exercise (in blood plasma: 14,1 and 37,8 mg/l), in total protein concentration (in saliva: 2 258,8 and 4 704,8 mg/l and in blood plasma: 89 848,2 and 80 102,7 mg/l) and lysozyme per gram of protein (in saliva: 3,5 and 0,9 mg/g and in blood plasma: 0,2 and 0,5 mg/g).

Kľúčové slová

lidský lysozym, nespecifická imunita, tělní tekutiny, radiální difúze, turbidimetrie, metoda Bradfordové, Micrococcus luteus, human lysozyme, nonspecific immunity, body fluids, radial diffusion, turbidimetry, Bradford assay

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 26. 8. 2021

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 10. 9. 2021
• Vedúci: MVDr. Mgr. Monika Dušková, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / odbor:
Upper Secondary School Teacher Training in Chemistry / Upper Secondary School Teacher Training in Biology