Studium produkce přírodního barviva kulturou rodu Micrococcus

Milan Pekárek

Bachelor's thesis

The Study of Exopigment Production in Chosen Strain of Genus Micrococcus

Abstract:

Tato bakalářská práce se zabývá zkoumáním vlivu vnějších faktorů na produkci modrého pigmentu kulturou Micrococcus lylae CCM 4431. Pigmentu byl dán pracovní název lylein. Byl zjišťován charakter lyleinu při růstu kultury na pevném a v tekutém médiu, význam glukosy v živném médiu, produkce lyleinu v závislosti na době kultivace, dále byly otestovány kultivační teploty pro produkci lyleinu, ověřena linearita spektrofotometrického stanovení lyleinu, ověřena možnost zjednodušení přípravy TYA agaru s glukosou, ověřena tvorba lyleinu při kultivaci na minerálních a obohacených agarech a ověřen růst kultury na TYA agaru s glukosou v závislosti na pH. Bylo prokázáno, že Micrococcus lylae CCM 4431 produkuje výrazné množství pigmentu na pevném TYA agaru s glukosou. Dále lze tvrdit, že k největší produkci pigmentu dochází na TYA agaru s glukosou při kultivační teplotě 30 °C. Pigment dosahuje maximálních hodnot absorbance v rozmezí vlnové délky 601 nm až 605 nm, přičemž je závislost absorbance na koncentraci téměř lineární při hodnotách absorbancí do 0,6. Dále z pokusů vyplynulo, že vyšší produkce pigmentu nastává u klasického způsobu přípravy živného agaru, tedy s přídavkem glukosy až po sterilizaci TYA agaru. Bylo také zjištěno, že nejvyšší produkce pigmentu se u minerálních agarů projevila na minerálním agaru s glukosou, tryptonem a vitamíny a bylo prokázáno, že trypton má zásadní význam pro tvorbu lyleinu. Také bylo zjištěno, že nejvyšší produkce pigmentu byla na miskách při pH 7,2 a 9,2 a krátkodobě i při pH 10,2; v alkalické oblasti pH však pigment po delší době kultivace degradoval.

Abstract:

This bachelor thesis deals with the investigation of the influence of different factors on violet pigment production in the strain Micrococcus lylae CCM 4431. The pigment was designated lylein and the work consisted of several experimental series: lylein characterization after strain growth on solid and in liquid media, determination of glucose important cein nutrient medium, production of lylein in dependency on cultivation time, testing of cultivation temperatures for lylein production, verification of linearity of lylein spectrophotometric determination, possibility of simplification of preparation of TYA agar with glucose, verification of lylein production during the growthon mineral and enriched agars and exploration of lylein formationat different pH levels. Micrococcus lylae CCM 4431 has been shown to produce a significant amount of pigment on solid glucose-enriched TYA agar. Furthermore, it can be argued that the greatest pigment production was recordedon TYA glucose agar at a temperature of 30 °C. Obtained pigment achieved maximum absorbance at the wavelength from 601 nm to 605 nm, with the absorbance-to-concentration dependence nearly linear at absorbance values of up to 0.6. Further, it was shown that higher pigment production occurredif glucose was added after sterilization of TYA agar. Also it was found that mineral agar with glucose, tryptone, and vitamins was the best medium for pigment production, and tryptone was shown to be essential for lylein formation. It was also found that the highest pigment production was ensuredat pH 7.2 and 9.2, and, briefly at pH 10.2; however, at the alkaline pH range, the pigment has degraded for a prolonged period of time.

Keywords

Micrococcus lylae, pigment, produkce, trypton

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 17. 5. 2019

Thesis defence

Tomas Bata University in Zlín

Faculty of Technology

Bachelor programme / field:
Chemistry and Materials Technology / Environmental Protection Engineering