Vyšetření D-dimeru u pacientů z okresu Jindřichův Hradec

Veronika PROCHÁZKOVÁ

Bachelor's thesis

Examination of D-dimer in patients from the district Jindřichův Hradec

Abstract:

Vyšetření hladiny (koncentrace) d-dimeru v plazmě slouží k zachycení několika patologických stavů. Mezi nejčastější patří venózní trombóza a plicní embolie. Jenom trombóza je diagnostikovaná u 71 pacientů ze 100 000 obyvatel ročně, u plicní embolie je to na stejný počet obyvatel 69 osob. Díky zjištění hladiny d-dimeru můžeme i určit riziko trombofilie, tedy náchylnosti ke vzniku trombóz. Trombózy jsou třetím nejčastějším patologickým stavem po infarktu myokardu a mozkové mrtvici. Dalším diagnostikovatelným stavem jsou nepochybně diseminovaná intravaskulární koagulace, malignita, akutní koronární syndromy, zánětlivá onemocnění. Zvýšenou hladinu nacházíme i v období těhotenství. Mými cíly bylo: 1. Osvojení si metody pro vyšetření d-dimeru, kterou používají v Nemocnici Jindřichův Hradec, a.s. na oddělení Hematologie a krevní transfúze, během 1 měsíce. 2. Zpracování alespoň 30 vzorků. D-dimer patří mezi štěpné produkty fibrinu. Vzniká při fibrinolýze, které předcházel sled reakcí koagulační kaskády. Jeho přítomnost v krvi tedy svědčí o určité fibrinolytické aktivitě v cévním systému. Jeho hladina se zvyšuje i po traumatech nebo operacích. Zvýšenou koagulací a následně vyvolanou fibrinolýzou mohou trpět lidé, kteří užívají hormonální léčbu. V teoretické části mé bakalářské práce jsem se zabývala tím, co je d-dimer, kdy vzniká. Zmínila jsem i koagulační kaskádu, která předchází samotné fibrinolýze. Zaměřila jsem se na hlavní trombotické stavy, při kterých je hladina d-dimeru zvýšená, z jakých příčin tyto stavy vznikají, jakým způsobem se dají diagnostikovat. Zabývala jsem se tím, která onemocnění mohou kvůli trombotickým stavům a trombofilii vzniknout, jaké jsou symptomy. V této části se nachází i druhy léčby trombotických stavů, materiál a podmínky práce se s ním, druhy hematologických vyšetření, možnosti stanovení d-dimeru a příprava protilátek. V praktické části je popsán příjem materiálu, jeho příprava k analýze, analýza, popis přístroje, potřebné reagencie, princip práce. Pracovala jsem na oddělení Hematologie a krevní transfúze v nemocnici v Jindřichově Hradci. Bylo mi umožněno vyšetřit 100 vzorků, ve většině od pacientů z ambulantních oddělení nemocnice. Pracovala jsem na automatickém koagulometru ACL Elite Pro a vyšetřila jsem hladinu d-dimeru. Ke stanovení d-dimeru v Jindřichově Hradci v rutinní praxi používají latex-aglutinační metodu. D-dimer obsažený v plazmě vytváří komplex s monoklonální protilátkou, která je navázaná na latexové částici. Samotný princip měření je imunoturbidimetrie, při 405 nm. Světelný paprsek se absorbuje na vzniklých imunokomplexech a měří se úbytek intenzity světla, které prošlo přes reakční kyvetu s analyzovaným vzorkem. Naměřené hodnoty d-dimeru jsem zpracovala do tabulek a grafů pomocí počítačového programu do samostatné části bakalářské práce. Výsledky jsem si rozdělila podle pohlaví, cut-off hodnoty d-dimeru užívané v Jindřichohradecké nemocnici, podle rizikového věku 45 let. Vytvořila jsem grafy a tabulky, podle kterých jsem hodnotila výzkum. Zvýšenou hladinu d-dimeru se mi podařilo prokázat u 56 pacientů, přičemž podíl mužů a žen byl stejný. Závislost zvýšené koncentrace na zvyšujícím se věku jsem nezpozorovala. Nepotvrzení dvou hypotéz může být zapříčiněno tím, že jsem vyšetřovala vzorky od malé skupiny pacientů, kteří měli diagnostikovaný nějaký patologický stav. Zvýšená koncentrace d-dimeru je nejčastěji způsobená životním stylem, dědičností. Při práci v laboratoři jsem si osvojila latex-aglutinační stanovení d-dimeru v plazmě.

Abstract:

Investigation of level (concentration) of d-dimer in the plasma is used to capture several pathological conditions. The most common is venous thrombosis and pulmonary embolism. Just thrombosis is diagnosed in 71 patients out of 100 000 inhabitants per year, pulmonary embolism in the same population in 69 inhabitants. Thanks to determine levels of d-dimer we can also determine the risk thrombophilia, a tendency to thrombosis. Thrombosis is the third most common pathological condition after myocardial infarction and stroke. Another states we can diagnose are undoubtedly disseminated intravascular coagulation, tumors, acute coronary syndromes, inflammatory disease. Increased level of d-dimer is found in pregnancy. My main objectives were to: 1. Acquisition of method for the examination of d-dimer, which is used in the Hospital Jindřichův Hradec, a.s. the Department of Haematology and Blood Transfusion, during one month. 2. Processing of at least 30 samples. D-dimer is one of the fission products of fibrin. It occurs in fibrinolysis, which was preceded by a sequence of reactions coagulation cascade. Its presence in the blood shows a fibrinolytic activity in the vascular system. Its level is increased after trauma or surgery. People taking hormonal therapy may suffer from increased coagulation and subsequently induced fibrinolysis. I deal in the tehoretical part of my thesis what is d-dimer, when arises. I mentioned also the coagulation cascade, which precedes the fibrinolysis. I focused on the main thrombotic condition in which the levels of d-dimer increased, from what causes these conditions arise, how they can be diagnosed. I was considering which diseases can develope because of thrombotic states and thrombophilia, what the symptoms are. In this section there is also the types of thrombotic conditions treatment, material, conditions of work with it, the types of hematological examination, the possibility of establishing d-dimer and preparation of antibodies. The practical part describes the receiption of material, its preparation for analysis, analysis, description of the apparatus, required reagents, the principle of work. I worked in the Department of Haematology and Blood Transfusion in the Hospital in Jindřichův Hradec. It was allowed to me to examine 100 patient samples, in most of the outpatient department of the hospital. I worked on the automatic coagulation analyzer ACL Elite Pro and I examined the levels of d-dimer. The latex-enhanced method is used to determine the d-dimer in routine practice in Jindřichův Hradec. D-dimer contained in the plasma forms a complex with the monoclonal antibody, which is bound to the latex particle. The principle of measurement is immunoturbidimetry, at 405 nm. The light beam is absorbed on the immune complexes and decrease of the transmitted light intensity, which passed through the reaction cell with a sample to be analyzed, is measured. I processed the measured values of d-dimer in tables and graphs using a computer program to separate part of the thesis. I divided the results according to gender, cut-off value of d-dimer used in hospital in Jindřichův Hradec, according to risk age of 45. I created graphs and tables and I evaluated the research. Increased level of d-dimer was showed in 56 patients, while the proportion of men and women was the same. I did not notice dependence on increased concentration with increasing age. Unconfirmed of two hypotheses may be due to the fact that I investigated samples from a small group of patients who were diagnosed with a pathological condition. Increased concentrations of d-dimer are most often caused by lifestyle and heredity. By working in the laboratory I have developed latex-agglutination d-dimer determination in plasma.

Keywords

d-dimer, imunoturbidimetrie, latexová aglutinace, plicní embolie, trombóza

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 14. 8. 2013

Accessible from:: 14. 8. 2013

Thesis defence

• Supervisor: doc. RNDr. Miroslav Šíp, DrSc.

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Studies

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Health Technician