Molekulární interakce onkogenů Mdm2 a MdmX

Bc. Kateřina Šmídová, Ph.D.

Master's thesis

Molecular interactions of oncogenes Mdm2 and MdmX

Abstract:

Proteiny Mdm2 a MdmX jsou důležitými regulátory funkce nádorového supresoru p53 a svou funkci vykonávají v kontextu celé sítě dalších regulačních proteinů. Tato práce je zaměřena na proteiny TOB3 a L11 jakožto potenciální vazebné partnery Mdm2 a MdmX. Práce se dále věnuje objasnění vlivu fosforylace centrální kyselé domény na aktivitu Mdm2 vůči p53. V práci bylo zjištěno, že a) TOB3 se váže ke kyselé doméně Mdm2 pravděpodobně ve dvou vazebných místech, b) TOB3 se zřejmě váže silněji k dimeru Mdm2/MdmX než k homodimeru Mdm2/Mdm2 či monomeru Mdm2, c) TOB3 působí pozitivně na stabilitu Mdm2 v buněčných liniích U2OS a HEK293T, d) L11 se váže k MdmX a jejich interakce je posílena, působíme-li na buňky látkou poškozující DNA, e) fosforylace serinů a tyrosinů v kyselé doméně Mdm2 zřejmě nemá ve většině případů negativní vliv na schopnost Mdm2 účinně degradovat p53. Výsledky práce zasazují studium onkogenů Mdm2 a MdmX do kontextu s dalšími buněčnými procesy jako je odpověď signální dráhy p53 na ribozomální stres a poškození DNA nebo apoptotické procesy probíhající v mitochondriích.

Abstract:

Mdm2 and MdmX are important regulators of the function of p53 tumor supressor protein; in this task they cooperate with other regulatory proteins. This thesis is focused on proteins TOB3 and L11, as they are possible novel interactors of Mdm2 and MdmX. The thesis also deals with the effects of Mdm2 acidic domain phosphorylation on the activity of Mdm2 toward p53. It was concluded that: a) TOB3 probably binds the acidic domain of Mdm2 at two binding sites, b) TOB3 possibly binds stronger to the Mdm2/MdmX dimer than to Mdm2/Mdm2 homodimer or Mdm2 monomer, c) TOB3 has positive effects on Mdm2 stability in U2OS and HEK293T cell lines, d) L11 binds MdmX and their interaction is augmented after treatment with a DNA-damaging agent, e) the phosphorylation of serines and tyrosines within the acidic domain of Mdm2 in most cases does not have negative effect on the ability of Mdm2 to induce p53 degradation. The results of this thesis put the research of oncogenes Mdm2 and MdmX into context with other cellular processes, such as the p53 signaling pathway response to ribosomal stress and DNA damage or the apoptotic processes taking place in mitochondria.

Keywords

p53, Mdm2, MdmX, TOB3, L11, kyselá doména Mdm2, Mdm2 acidic domain

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 15. 5. 2012

Thesis defence

• Date of defence: 15. 6. 2012
• Supervisor: Mgr. Stjepan Uldrijan, CSc.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / field:
Biology / Molecular Biology and Genetics