Vliv genisteinu na schopnost kančích spermií podstoupit proces akrosomální reakce

Adéla Matyásková

Master's thesis

Performance of Alpaca wool in the Czech Republic

Abstract:

Cílem této práce je v podmínkách in vitro zjistit úroveň akrosomální reakce u kančích spermií bez a po přídavku genisteinu do media. Zaměřila jsem se konkrétně na vliv různé koncentrace a dobu expozice genisteinu. Testována byla hypotéza, zda genistein snižuje podíl spermií, u kterých proběhla akrosomální reakce. Strukturálně i funkčně se genistein přirovnává ke známému estrogenu 17beta-estradiolu. V těle živočichů se genistein váže na estrogenní receptory a bylo zjištěno, že se liší svým působením především v závislosti na koncentraci, a to jak negativně, tak i pozitivně. Svými účinky genistein ovlivňuje vývoj spermií, vyvolává vývojové anomálie reprodukčních orgánů, poruchy plodnosti a působí pozitivně na indukci kapacitace a akrosomální reakce. Za účelem splnění cílů této práce byly realizovány dva experimenty s částečně rozdílnou metodikou kapacitačního protokolu, které souhrnně umožnily zhodnocení účinků genisteinu. Hodnocenými parametry byl podíl spermií s rozpadlou akrosomatickou membránou a podíl živých spermií. Experimenty se lišily v různých koncentracích a době expozice. K vyhodnocení variant bylo využito fluorescenční mikroskopie. Varianty, kde působil genistein před i během kapacitace, mají vyšší koncentrace genisteinu (GEN20c) oproti variantám s expozicí pouze před dobou kapacitace protektivní charakter. Působení snižující se koncentrace genisteinu pouze po dobu kapacitace byly spojeny s nižším přežíváním spermií. Signifikantní pokles životnosti spermií byl zaznamenán za přídavku genisteinu v koncentraci 5 mikroM a 1 mikroM. V experimentu nebyl prokázán signifikantní vliv různých koncentrací genisteinu na akrozomální reakci oproti pozitivní kontrole.

Abstract:

The aim of this work is in vitro to determine the level of acrosome reaction in boar spermatozoa without and after addition of genistein in the media. I focused specifically on the effect of different concentrations and time of exposure to genistein. Tested the hypothesis that genistein reduces the proportion of sperm, which have undergone acrosome reaction. Structurally and functionally with genistein compares to a friend estrogen 17beta-estradiol. In an animal body with genistein binds to estrogen receptors and was found to differ in their action mainly depending on the concentration, both negatively and positively. Its effects genistein affects sperm development, causes developmental abnormalities of the reproductive organs, infertility and has a positive effect on the induction of capacitation and acrosome reaction. In order to meet the objectives of this work were carried out two experiments with partially different methodology kapacitačního Protocol, which collectively enable evaluation of the effects of genistein. Endpoint of the proportion of sperm with dilapidated akrosomatickou membrane and the percentage of viable sperm. The experiments were varied in different concentrations and exposure time. To evaluate variants were used fluorescence microscopy. Variants, where he genistein before and during capacitation, have higher concentrations of genistein (GEN20c) variants compared with the exposure time only before capacitation protective character. Effect of decreasing concentrations of genistein only during capacitation were associated with lower sperm survival. Significant reductions in the life of the sperm was observed with the addition of genistein concentration of 5 mikroM and 1 mikroM, when the operation of this concentration adversely affect the viability of sperm. In the experiment has not been demonstrated a significant effect of different concentrations of genistein on acrosome reaction versus a positive control

Keywords

genistein, spermie, endokrinní disruptor, kanec, kapacitace, akrosomální reakce

Keywords

boar, sperm, genistein, an endocrine disruptor, capacitation, acrosome reaction

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 22. 4. 2015

Thesis defence

• Supervisor: doc. MVDr. Radko Rajmon, Ph.D.
• Reader: Marie Koubková, externi

Czech University of Life Sciences Prague

Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources

Master programme / field:
Animal Science / Special Animal Raising