Diabetes mellitus versus celiakie, genetické testování uvedených onemocnění pomocí kitu Protrans

Barbora PARÝZKOVÁ

Bachelor's thesis

Diabetes mellitus versus celiac disease, genetic testing of the above mentioned diseases using the Protrans kit

Abstract:

Celiakie je autoimunitní onemocnění postihující zejména sliznici tenkého střeva. K rozvoji tohoto onemocnění dochází u geneticky predisponovaných jedinců, ale vznik onemocnění je kromě genetických faktorů podmíněn i faktory environmentálními. Genetická predispozice je připisována zejména HLA systému, a to konkrétně HLA-DQ2 a HLA-DQ8 haplotypům. Onemocnění celiakie je charakterizováno mnoha klinickými příznaky, a proto je jeho diagnostika obtížná a mnoho případů zůstává stále nediagnostikováno. Cílem bakalářské práce v teoretické části bylo sepsání poznatků na dané téma, kde se věnuji z velké části celiakii, a diabetu 1. typu pouze jako přidruženému onemocnění, které se může společně s celiakií vyskytovat. Zabývala jsem se zejména výskytem celiakie, její patogenezí, příznaky a formami, některými možnými diagnostickými přístupy a účinnou léčbou. V závěru teoretické části uvádím také další možná s celiakií asociovaná onemocnění. Praktickou část mé práce jsem prováděla v genetické laboratoři GENLABS. Jednalo se o vyšetření genetických predispozic k celiakii, které je založené na HLA typizaci pomocí komerčně dodávaného kitu Protrans. Cílem práce této části bylo praktické zvládnutí diagnostické metody k určení rizikového HLA haplotypu. Dále zvládnutí metod izolace DNA z periferní krve a bukálního stěru, příprava a provedení PCR reakce a detekce vzniklých PCR produktů na agarózovém gelu pomocí gelové elektroforézy. V současné době se již stanovení predispozic k celiakii v laboratoři Genlabs neprovádí pomocí kitu Protrans, ale nahradila ho metoda založená na principu real-time PCR, která je oproti dříve používané metodě méně pracná a méně časově i finančně náročná.

Abstract:

Celiac disease is an autoimmune disease affecting the mucous membrane of small intestine. The development of this disease is affected by genetic predispositions, but the onset of this disease is also influenced by environmental factors. Genetic predisposition is primarily attributed to HLA system, HLA-DQ2 and HLA-DQ8 in particular. Celiac disease is characterized by many symptoms therefore its diagnosis is difficult and stays undiagnosed in many cases. The aim of the theoretical part of this bachelor´s thesis was to summarize the knowledge of this topic regarding celiac disease and diabetes type 1. as an associated disease, possibly coexisting with celiac disease. The work, dealt with celiac disease occurrence, its pathogenesis, symptoms and types and possible diagnostic approaches and effective treatment. In the end of the theoretical part it also mentions possible associated diseases with celiac disease. The practical part of my work took part in the genetic laboratory GENLABS, where the examination of genetic predispositions to celiac disease were conducted, based on HLA typing using commercially available Protrans kit. The aim of the practical part was to master the diagnostic method of determining the risk HLA haplotype. Further, mastering the DNA isolation method, using peripheral blood and buccal smear, preparation and execution of Polymerase Chain Reaction (PCR) and detection of created PCR products using gel electrophoresis on agarose gel. The Protrans kit is not used for determination of the predispositions to celiac disease in GENLABS any more, it was replaced by real-time PCR method, which is less burdensome and faster and less financially demanding, than the previous one.

Keywords

celiakie, HLA- systém, diabetes mellitus 1. typu

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 3. 5. 2016

Accessible from:: 3. 5. 2016

Thesis defence

• Supervisor: Mgr. Dagmar Bystřická, Ph.D.

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Studies

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Health Technician