Cytotoxicky aktivní triterpeny a studium jejich mechanizmu účinku.

Bc. Jiří HODOŇ

Diplomová práce

Cytotoxic triterpenes and study of their mechanism of action

Anotace:

Tato práce se zabývá zjišťováním mechanizmu účinku cytotoxicky aktivních triterpenů. Byly připraveny konjugáty triterpenů s deriváty glukózy pomocí Huisgenovy cykloadice. Byly změřeny cytotoxicné aktivity všech připravených sloučenin. Byly vybrány nejaktivnější látky a studován jejich mechanizmus účinku: 1. Byl analyzován jejich vliv na buněčný cyklus, apoptózu a na syntézu nukleových kyselin s použitím metod průtokové cytometrie; 2. aktivní pyrazin s nejlepším terapeutickým indexem byl dále biotinylován a použit v pull down esejích vyhodnocovaných pomocí kvantitativní proteomiky v kombinaci se SILAC. Byla nalezena skupina proteinů, se kterými tento pyrazin selektivně interaguje, tyto proteiny tak mohou být cíli zodpovědnými za jeho aktivitu. V budoucnu však bude nutné tyto potenciální cíle validovat alternativními metodami.

Abstract:

The aim of this thesis is investigation of mechanism of action of cytotoxic active triterpenes. The conjugates of triterpenes with glucose derivates were prepared using Huisgen cycloaddition. Cytotoxic activities of all prepared compounds were measured. The most active derivates were further examined for their mechanism of action: 1. First, influence of the active compounds on cell cycle was studied, then influence on apoptosis and nucleic acid synthesis using flow cytometry methods. Active pyrazine with the most promising therapeutic index was selected and used in pull down assays evaluated by quantitative proteomics and SILAC to find a set of proteins that bind selectively to the molecule and which may be responsible for the activity. A group of specifically interacting proteins were found, however, in the future, these potential targets will have to be validated by alternative methods.

Klíčová slova

Kyselina betulinová, click chemie, průtoková cytometrie, SILAC, pull-down eseje

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 4. 5. 2017

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: doc. RNDr. Milan Urban, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biologie / Molekulární a buněčná biologie