Moderní kryoprotektory využívané při konzervaci spermatu u beranů plemene valašská ovce

Hana Lorencová

Bachelor's thesis

Modern cryoprotectors used for the ram semen preservation in Wallachian sheep

Abstract:

Bakalářská práce byla zaměřená na téma Moderní kryoprotektory využívané při konzervaci spermatu u beranů plemene valašská ovce. Cílem bakalářské práce bylo popsat využití moderních kryoprotektorů při konzervaci semene a navržení postupů pro optimalizaci výroby inseminačních dávek, popř. zlepšení úspěšnosti při následné inseminaci. Valašská ovce je původní české hrubovlnné plemeno s trojstrannou užitkovostí (maso, vlna, mléko). Od roku 1999 je valašská ovce součástí genetických zdrojů České republiky. Proto je nezbytné pro záchranný program ochrany tohoto plemene vytvořit dostatečný reservoár inseminačních dávek od geneticky cenných jedinců v populaci. Umělá inseminace je nejprogresivnější metodou pro moderní chov ovcí. Inseminaci lze provést čerstvým, chlazeným nebo mraženým spermatem. Jedinou možností pro dlouhodobé uchování inseminačních dávek je zmrazení spermií pomocí kapalného dusíku. Kryokonzervace spermatu berana je nejdůležitějším postupem při vývoji programu konzervace valašského plemene. I když se dnes přiliš nepoužívá, především kvůli nízké kvalitě zmraženého a rozmraženého beraního spermatu. Důvodem je, že nejsou dostatečně ověřená ředidla pro malé přežvýkavce. Proto je důležité vytvářet modifikace stávajících ředidel, které zlepšují parametry zejména dlouhodobě konzervovaných dávek. Ředidla používaná k ředění spermatu malých přežvýkavců byla vyvinuta k ochraně a udržení spermatu během zpracování a skladování. Kryoprotektory, které se přidávají do ředícího média, aby chránily buňku před kryo-poškozením, se dělí na intracelulární a extracelulární kryoprotektory. Nejčastěji používaným intracelulárním kryoprotektantem je glycerol. V této práci budou dále zmíněny také amidy, dimethylsulfoxid a extracelulární kryoprotektanty jako je vaječný žloutek, cukry, antioxidanty a vitamíny, antifreeze proteiny. Na konci této práce byla připravena koordinovaná tabulka s moderními kryoprotektory a navrženy nejlepší kryoprotektory. Nejlepší kryoprotektory, který byly navrženy pro valašské berany jsou následující: glycerol dále thehalóza a vaječný žloutek. V rámci kryokonzervačního programu by měli být dále ověřeny a následně testovány u valašských ovcí. Bakalářská práce může být přinosem pro chovatele valašských ovcí, kteří chtějí získat aktuální infomace o kryoprotektorech používaných při konzervaci spermatu.

Abstract:

The bachelor thesis was focoused on the topics of moderm cryoprotectants used in the preservation of sperm in rams of the Wallachian sheep breed. The aim of the bachelor thesis was to describe the use of moderm cryoprotectants in seed preservation and design procedures for optimizing the production of insemination doses, or improving success in subsequent insemination. Wallachian sheep is an original Czech coarse wool breed with three-sided performance (meat, wool, milk). Since 1999 Wallachian sheep belongs to the genetic reserves of the Czech Republic. Therefore, it is essential to develop a conservation program for this breed. Artificial insemination is the most progressive method for modern sheep breeding. Insemination can be performed with fresh, chilled or frozen semen. Sperm freezing with the use of the liquid nitrogen is the only option for the long-term preservation of insemination doses. Cryopreservation of ram sperm is the most important procedures in the development of Wallachian breed conservation program. Although it's not used as much these days, mainly due to the low quality of frozen and thawed lamb sperm. This is because diluents for small ruminants are not well tested. Therefore, its important to create a modification of existing diluents, which especially improve the parameters of long-term preserved doses. Diluents used to dilute small ruminant semen have been developed to protect and maintain sperm during processing and storage. Cryoprotectors, which are added to the dilution medium to protect the cell from cryo-damage, are divided into intracellular and extracellular cryoprotectants. The most commonly used intracellular cryoprotectant is glycerol. Amides, dimethyl sulfoxide and extracellular cryoprotectants such as egg yolk, sugars, antioxidants, vitamins, antifreeze-proteins will also be mentioned in this work. At the end of this work, a coordinated table with modern cryoprotectors was prepared and the best cryoprotectors were designed. The best cryoprotectors that have been designed for the Wallachian ram are as follows: glycerol, thehalose and egg yolk. As part of the cryopreservation program, they should be further verified and subsequently tested in Wallachian sheep. The bachelor thesis can be a benefit for Wallachian sheep breeders who wants to get current infomation about cryoprotectors used in sperm conservation.

Keywords

Genová rezerva, Inseminace ovcí, Průtoková cytometrie, CASA, Ředidlo

Keywords

Gene reserve, Insemination of sheep, Flow cytometry, CASA, Thinner

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 22. 4. 2022

Thesis defence

• Supervisor: Ing. Martin Ptáček, Ph.D.

Czech University of Life Sciences Prague

Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources

Bachelor programme:
Animal Production