Stanovení aktivity cytochromu P450 2E1 v primárních kulturách hepatocytů

Bc. Markéta Zelendová

Diplomová práce

Evaluation of cytochrome P450 2E1 activity in primary cultures of hepatocytes

Anotace:

Tato práce byla zaměřena na zavedení metody stanovení aktivity enzymu cytochrom P450 2E1 v primárních kulturách hepatocytů potkana a myši pomocí enzymatické přeměny substrátu p-nitrofenolu na p-nitrokatechol. Ke zjištění optimální koncentrace p-nitrofenolu pro stanovení aktivity cytochromu P450 2E1 bylo nejprve nutno zjistit, zda p-nitrofenol nevykazuje toxické účinky na hepatocyty v primární kultuře. Míra poškození hepatocytů in vitro byla hodnocena pomocí aktivity laktátdehydrogenázy v kultivačním médiu a aktivity celulárních dehydrogenáz (WST-1 test).

Abstract:

This work was focused on introduction of method for evaluation of cytochrome P450 2E1 activity in primary cultures of rat and mouse hepatocytes by enzymatic conversion of the substrate p-nitrophenol to p-nitrocatechol. To find the optimal concentration of p-nitrophenol for evaluation of cytochrome P450 2E1 activity was necessary to exclude the potential toxic effect of p-nitrophenol on hepatocytes in primary culture at first. Parameters of hepatocyte damage in vitro were determined by lactate dehydrogenase activity in the culture medium and activity of cellular dehydrogenases (WST-1 test).

Klíčová slova

primární kultury hepatocytů, p-nitrofenol, p-nitrokatechol, cytochrom P450 2E1, aktivita cytochromu P450 2E1

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 10. 5. 2017

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 6. 6. 2017
• Vedoucí: doc. MUDr. Otto Kučera, Ph.D.

Univerzita Pardubice

Fakulta chemicko-technologická

Magisterský studijní program / obor:
Speciální chemicko-biologické obory / Bioanalytik