Studium vlivu signální dráhy receptoru pro vitamín D (VDR) na aktivitu aryluhlovodíkového receptoru (AhR) ve střevní linii LS174T

Andrea KISKOVÁ

Bakalářská práce

The study of the vitamin D receptor (VDR) signalling pathway effect on the activity of arylhydrocarbon receptor (AhR) in the intestinal cell line LS174T

Anotace:

Práce se zaměřuje na studium vlivu aktivovaného receptoru pro vitamín D (VDR) na biotransformační enzym CYP1A1 v buněčné linii odvozené z adenokarcinomu tlustého střeva (LS174T). Receptor byl aktivován potentním agonistou kalcitriolem ve třech koncentracích blízkých fyziologickému stavu (10, 75, 150 nM). Indukce enzymu CYP1A1 byla zprostředkována pomocí aryluhlovodíkového receptoru (AhR), který byl aktivován modelovým induktorem 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxinem (TCDD, 5 nM). Po 24 hodinách inkubace byla stanovena hladina mRNA CYP1A1pomocí polymerázové řetězové reakce v reálném čase a po 48 hodinách 7-ethoxy-O-resorufin deethylásová katalytická aktivita enzymu. Výsledky ukazují na statistický pokles katalytické aktivity v nejvyšší zkoumané koncentraci kalcitriolu s TCDD. Pokles hladiny mRNA byl zjištěn s rostoucí koncentrací kalcitriolu v kombinaci s TCDD. Výsledky naznačují funkční interakci mezi VDR a AhR signalizační dráhou.

Abstract:

The work is focused on the study of the influence of activated receptor for vitamin D (VDR) on biotransformation enzyme CYP1A1 in adenocarcinoma-derived cell line (LS174T). Receptor was activated by potent agonist calcitriol, in doses relevant to physiological conditions (10, 75, 150 nM). The induction of enzyme CYP1A1 was mediated by aryl hydrocarbon (AhR), activated by model inducer 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD, 5 nM). After 24 hours of incubation, the level of CYP1A1 mRNA was determined by polymerase chain reaction in real time and after 48 hours, the 7-ethoxy-O-resorufin deethylase aktivity was determined. The results showed a statistical decrease in catalytic activity at the highest concentration of studied calcitriol with TCDD. Decreased level of mRNA was detected with increasing concentration of calcitriol in combination with TCDD. The results suggest a functional interaction between VDR and AhR signaling pathway.

Klíčová slova

xenobiotika, CYP1A1, vitamín D, aryl uhlovodíkový receptor

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 6. 8. 2013

Zveřejnit od: 6. 8. 2013

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Doc. Ing. Radim Vrzal, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biologie / Molekulární a buněčná biologie