Vícebarevná imunofluorescence v histologii

Sylvie HOLUBOVÁ

Bachelor's thesis

Multicolor immunofluorescence in histology

Abstract:

Vícebarevná imunofluorescence je metoda umožňující simultánní zobrazení většího množství protilátek indikovaných v jednom vzorku. Teoretická část práce se zaměřuje na obecnou histologii, její odvětví a histologické metody. Dále popisuje metody imunohistochemie, zahrnuje základy imunofluorescence a imunofluorescenční mikroskopie. Praktická část této práce se zabývá optimalizací metody vícebarevné imunofluorescence, konkrétně metody Opal Multiplex. Tato metoda umožňuje efektivní zobrazení imunohistochemického komplexu protilátky s antigenem, který je následně označen pomocí fluoroforů a stává se tak viditelným pro fluorescenční mikroskopii. Aby byla metoda úspěšná, musí být proveden vhodný výběr, kombinace protilátek a optimalizace metodiky. Díky využití více než jedné protilátky v kombinaci s různými fluorofory, lze zobrazit simultánně až 4 různé tkáňové markery v jednom vzorku. Tato metoda přispívá k lepší diagnostice, volbě vhodné terapie a určení prognózy onemocnění. Má také význam pro studii imunobiologie tkání.

Abstract:

Multicolor immunofluorescence is a method that allows the simultaneous imaging of multiple antibodies indicated in a single sample. The theoretical part of the thesis focuses on general histology, it's branches and histological methods. It also describes the methods od immunohistochemistry, includes the basics of immunofluorescence and immunofluorescence microscopy. The practical part of this work deals with the optimization of the multicolor immunofluorescence method, specifically the Opal Multiplex method. This method allows efficient imaging of the immunohistochemical complex of the antibody with the antigen, which is subsequently labeled with fluorophores and thus becomas visible for fluorescence microscopy. For the method to be successful, appropriate selection, combination of antibodies, and methodology optimization must be made. Thanks to the use of more than one antibody in combination with different fluorophores, up to 4 different tissue markers can be displayed simultaneously in one sample. This method contributes to better diagnosis, choice of appropriate therapy and prognosis. It is also important for the study of tissue immunobiology.

Keywords

Histologie, Opal Multiplex, antigen, protilátka, vícebarevná imunofluorescence, fluorescenční mikroskopie

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 28. 4. 2022

Accessible from:: 31. 12. 2999

Thesis defence

• Date of defence: 14. 6. 2022
• Supervisor: Mgr. Tereza Hulínová

University of Ostrava

Faculty of Medicine

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Health Laboratory Assistant