Význam detekce polymorfismů v genech pro methylentetrahydrofolátreduktázu C667T (MTHFR C667T) a apolipoproteinu E (ApoE) v souvislosti s onemocněním osteoporózy

Markéta ŠILHOVÁ

Bachelor's thesis

Significance of detection of the ApoE gene and MTHFR gene polymorphisms for osteoporosis.

Anotácia:

Osteoporóza je metabolické onemocnění skeletu, charakterizované změnami kostní tkáně, poruchou mechanické odolnosti kosti s rizikem vzniku zlomenin. Tomuto onemocnění podléhají pacienti ve věku nad 60 let, nevyhýbá se však ani mužům a ženám v pokročilých věkových skupinách. Postihuje především ženy po menopauze. Prevalence osteoporózy stále stoupá, touto nemocí trpí ve světě více než 200 milionů lidí, v České republice téměř milion osob. Osteoporóza se stala problémem nejen zdravotnickým, ale i ekonomickým. Tomuto onemocnění by se mělo více věnovat i z pohledu genetických rizikových faktorů. Cílem mé bakalářské práce bylo napsat odbornou rešerši na dané téma, shrnout poznatky o osteoporóze, věnovat pozornost diagnostice a genetickým dispozicím, věnovat se zejména genům ApoE a MTHFR677. Gen pro ApoE hraje silnou genetickou roli v kosterní homeostáze, přítomnost alely 4 genu pro apolipoprotein E představuje nejvyšší riziko pro vznik osteoporózy. Gen MTHFR677 je nejvíce spojován s kostní minerální denzitou na krčku stehenní kosti. V experimentální části bylo cílem praktické zvládnutí některých molekulárně biologických metod především izolace DNA z periferní krve, příprava a provedení PCR reakce, detekce PCR produktů pomocí gelové elektroforézy, vyšetření genu ApoE pomocí kitu MyTaq Red DNA Polymerase a 2x PCRBIO HS Taq Mix, vyšetření MTHFR pomocí kitu MyTaq Red DNA Polymerase. Princip detekce u ApoE je založen na ARMS PCR, u MTHFR677 je princip detekce založen na RFLP PCR. Veškeré metody jsem prováděla v genetické laboratoři GENLABS v Českých Budějovicích.

Abstract:

Osteoporosis is the sceletal metabolic disease characterized by changes of bone tissue and disfunction of mechanic bone resistance which can lead to numerous bone fractures. Osteoporosis is frequently diagnosed in patients older than 60 years, also advanced age patients are not an exception for this disease. The most frequently affected group of patients is postmenopausal women. Prevalence of osteoporosis still rises. Nowadays more than 200 millions of people suffer from osteoporosis and one million of patients from Czech republic. Osteoporosis have became a serious complication affecting not only medical but also an economic field. Based on these findings, osteoporosis should be considered as an important topic even from the perspective of genetic risk factors. The aim of my bachelor thesis is to write a specialized research focused on introduced topic, summarize accessible information about osteoporosis, including diagnosis and genetic predisposition. I have focused especially on genes ApoE and MTHFR677. ApoE plays an important role in sceletal homeostasis. The highest risk for osteoporosis development is the presence of alel 4 gene for alipoprotein E. Gen MTHFR677 is mostly associated with bone mineral density located in femoral neck. An experimental part of bachelor thesis was based on laboratory practice in molecular biology field inluding isolation of DNA from peripheral blood, PCR technique, detection of PCR products by gel agarose electrophoresis, analysis of ApoE gel by MyTaq Red DNA Polymerase kit and 2x PCRBIO HS Taq Mix, analysis of MTHFR677 gene by MyTaq Red DNA Polymerase kit. Analysis of ApoE gene is based on ARMS PCR method, on the other hand analysis of MTHFR677 is based on RFLP PCR method. I have performed the laboratory practice within the Laboratory of genetics GENLABS in České Budějovice.

Kľúčové slová

Osteoporóza, gen, DNA, ApoE, MTHFR677, RFLP-PCR, PCR ARMS

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 3. 5. 2017

Obhajoba závěrečné práce

• Vedúci: Mgr. Dagmar Bystřická, Ph.D.

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Studies

Bachelor programme / odbor:
Specialization in Health Service / Health Technician