Určení dimer-monomerní rovnováhy proteinu 14-3-3

Bc. Veronika Weisová

Diplomová práce

Determination of the dimer-monomer equilibrium of the 14-3-3 protein

Anotace:

14-3-3 proteiny jsou rodina regulačních proteinů, které ovlivňují různé biologické procesy u eukaryontních organizmů. Aktivní jsou hlavně v dimerní formě. Avšak, dimerní forma může být regulována fosforylací Ser-58 nebo bodovými mutacemi, což má za následek posun dimer-monomerní rovnováhy. V rámci této diplomové práce jsem připravila konstrukt 14-3-3ζ proteinu, který může být specificky fluorescenčně označen. Procedura fluorescenčního značení byla optimalizována a byly určené kinetické parametry disociace proteinu pomocí Fӧrsterovho rezonančního přenosu a procesu samozhášení.

Abstract:

14-3-3 proteins are family of regulatory proteins that affect various biological processes in eukaryotic organisms. They are active mainly in its dimeric form. However, dimeric form can be regulate by phosphorylation of Ser-58 or point mutations resulting in a shift of dimer-monomer equilibrium. In this diploma thesis, I prepared construct of 14 3 3ζ protein that can be specifically fluorescently labelled. The fluorescent labelling procedure was optimized and kinetic parameters of dissociation were determined by Fӧrster resonance energy transfer and self-quenching process.

Keywords

14-3-3, dimerizace, kinetika, fluorescence, FRET, zhášení, dimarization, kinetics, quenching

Jazyk práce: angličtina

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 16. 5. 2016

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 16. 6. 2016
• Vedoucí: RNDr. Mgr. Jozef Hritz, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Biomolekulární chemie