Hodnocení aglutinačních reakcí za pomoci softwarové aplikace se zaměřením na degradaci krevně-specifických substancí a některé aspekty fenoménu sekretorství

Bc. Tomáš Pakosta

Diplomová práce

Evaluation of Agglutination Reactions Using a Software Application, with Focus on the Degradation of Blood-group Antigens and Some Aspects of the Secretory Phenomenon

Anotace:

Tato práce se zaměřila na hodnocení stanovení antigenů krevního systému AB0 s využitím speciální softwarové aplikace Blot v1.0. Experimentální stanovení antigenů systému AB0 probíhalo sérologickými metodami. Testování byly podrobeny biologické vzorky slin, vlasů a uměle připravených krevních skvrn. Skvrny byly po určitou dobu vystaveny degradujícím fyzikálním a mikrobiologickým podmínkám. Pro stanovení krevních skupin z vlasů byla využita absorpčně eluční metoda. Z celkového počtu 90 vzorků jsme dokázali stanovit krevní skupinu u 57 vzorků v rámci vizuálního hodnocení a 67 vzorků pomocí aplikace Blot v1.0. Pro stanovení krevních skupin ze slin jsme využili absorpčně inhibiční metodu. Zde se nám podařila určit krevní skupina včetně statutu sekretora u všech testovaných vzorků za pomoci vizuálního i počítačově asistovaného hodnocení. Krevní skupina z kožních derivátů (vlasů) nesekretorů se nám podařila určit u 31,8 % vzorků. V 85,7 % se jednalo o krevní skupinu typu A. Krevní skvrny jsme testovali metodou smíšené aglutinace o dvou modifikacích. V první modifikaci pokusu jsme inkubovali vzorky při relativní vlhkosti vzduchu nepřesahující hodnotu 8 %. Zde jsme dokázali stanovit 96,7 % vzorků krevní skupiny A, 100 % vzorků krevní skupiny B a 61,7 % vzorků krevní skupiny 0. V druhé modifikaci pokusu jsme inkubovali krevní skvrny při relativní vlhkosti vzduchu neklesající pod hodnotu 94 %. Zde došlo k silnému nárůstu mikroorganismů, což znemožnilo stanovení správné krevní skupiny. U všech testovaných vzorků tak byla stanovena krevní skupina typu AB. Analýza výsledků vizuálního a softwarového hodnocení ukázala, že rozdíl mezi oběma metodami odečítání výsledků není statisticky významný.

Abstract:

This thesis focused on the evaluation of AB0 blood system antigens determination using a special software application Blot v1.0. Experimental determination of AB0 antigens was carried out using serological methods. Biological samples of saliva, hair, and artificially prepared bloodstains were subjected to this testing. Stains were, for a certain period of time, exposed to degrading physical and microbiological conditions. Absorption elution method was used to determine blood type of a human hair. Of the total 90 samples we were able to determine blood type in 57 samples using visual assessment, and in 67 samples using the Blot v1.0 application. To determine the blood type of saliva, we used an absorption inhibition method. Here we succeeded to determine blood type, including secretor status, in all samples tested using visual and computer-assisted assessments. For non-secretors skin derivatives (hair) we succeeded to identify blood type in 31,8 % of samples. In 85,7 % samples they were blood type A. We tested bloodstains by using mixed method of agglutination with two modifications. In the first modification of the experiment we incubated samples at a relative humidity not exceeding the value of 8 %. Here we were able to determine 96,7 % of the samples of blood type A, 100 % of the samples of blood type B, and 61,7 % of samples of blood type 0. In the second modification of the experiment we incubated blood spots at a relative humidity not decreasing below 94 %. There was strong growth of microorganisms in this modification making it impossible to determine the correct blood type. Blood type AB was thus assigned to all tested samples. Analysis of the results of visual and software evaluations showed that there is no statistically significant difference in the two sample reading methods.

Klíčová slova

AB0 systém, antigeny, protilátky, vlasy, sliny, krevní skvrny, sekretor, počítačový software Blot v1.0., antigens, antibodies, hair, saliva, blood stains, secretor, computer software Blot v1.0.

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 14. 5. 2013

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 5. 6. 2013
• Vedoucí: RNDr. Helena Nejezchlebová, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Experimentální biologie / Speciální biologie