Vývoj metod pro stanovení biologicky aktivních látek pomocí separačních technik a hmotnostní spektrometrie

Ing. Blanka Vrbková, Ph.D.

Disertační práce

Separation techniques and mass spectrometry for analysis of bioactive components

Anotace:

Předkládaná disertační práce je souborem prací zabývajících se využitím separačních technik a hmotnostní spektrometrie pro stanovení vybraných biologicky aktivních látek, a to antimikrobiálních peptidů z obilky ječmene/sladu a sterolů z rostlinných olejů. Hlavními cíli práce bylo stanovení různých analytů rozličnými metodickými přístupy a vývoj metodiky využívající nekonvenční matrici ke stanovení nepolárních látek (sterolů). Gelová elektroforéza v denaturujících podmínkách s detekcí MALDI MS (hmotnostní spektrometrie s laserovou desorpcí/ionizací za účasti matrice, Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization Mass Spectrometry) byla využita pro stanovení antimikrobiálních peptidů a pozorování chemických změn probíhajících při interakci patogen-obilka. Nová metodika kombinující kapalinovou chromatografii s následnou off-line detekcí SALDI MS (hmotnostní spektrometrie s laserovou desorpcí/ionizací za účasti povrchu, Surface Assisted Laser Desorption/Ionization Mass Spectrometry) za použití suspenze stříbra jako matrice byla aplikována pro stanovení rostlinných sterolů.

Abstract:

This dissertation thesis comprises studies dealing with an application of separation technique and mass spectrometry for the determination of selected bioactive components, namely antimicrobial peptides in barley/malt caryopsis and sterols in vegetable oils. The main goals of this thesis were the determination of various analytes by different methodological approaches and the development of a new method using an unconventional matrix to determine nonpolar compounds (sterols). Gel electrophoresis in denatured conditions with MALDI MS detection (Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization Mass Spectrometry) was used for antimicrobial peptides determination and monitoring of chemical changes during the pathogen-caryopsis interaction. A new method involving liquid chromatography with off-line SALDI MS detection (Surface Assisted Laser Desorption/Ionization Mass Spectrometry) using silver suspension as a matrix was applied for the determination of sterols in vegetable oils.

Klíčová slova

biologicky aktivní látka, antimikrobiální peptidy, steroly, 1 D SDS-PAGE, RPLC, MALDI MS, off-line spojení, SALDI MS, bioactive components, antimicrobial peptides, sterols, off-line coupling

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 2. 1. 2018

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 14. 2. 2018
• Vedoucí: prof. Mgr. Jan Preisler, Ph.D.
• Oponent: doc. RNDr. Zbyněk Zdráhal, Dr., prof. RNDr. Karel Lemr, Ph.D., doc. RNDr. Josef Cvačka, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Doktorský studijní program / obor:
Chemie (čtyřleté) / Analytická chemie