Detekce tvorby biofilmu u stafylokoků a její význam v diagnostice

MUDr. Filip Růžička, Ph.D.

Disertační práce

Detection of the biofilm formation in staphylococci and its clinical relevance

Anotace:

Tvorba biofilmu je významným faktorem virulence S. epidermidis. Biofilm pozitivní bakterie lépe odolávají účinku antibiotik a imunitního systému a stávají se tak příčinou chronických infekcí. Biofilmpozitivní kmeny S. epidermidis mohou být klinicky významnější ve srovnání s biofilmnegativními kmeny. Cílem práce bylo posoudit: vliv kultivačních podmínek na tvorbu biofilmu; hodnotu průkazu schopnosti tvořit biofilm (vč. přítomnosti genů ica operonu) pro posouzení klinické významnosti konkrétního kmene; možnost využití kapilární izoelektrické fokusace pro odlišení biofilmpozitivních a biofilmnegativních kmenů S. epidermidis. Tvorba biofilmu i geny ica operonu byly častěji přítomny u klinicky významných izolátů z krevního řečiště kmenů než u kmenů izolovaných z kůže. Pomocí kapilární izoelektrické fokusace byly zjištěny izoelektrické body biofilmpozitivních (pI = 2,3) i biofilmnegativních kmenů (pI = 2,6). Izoelektrický bod lze považovat za užitečné kritérium pro odlišení biofilmpozitivních kmenů od biofilmnegativních.

Abstract:

The biofilm formation is an important factor of S. epidermidis virulence. The biofilm-forming bacteria are difficult to eradicate with antibiotics and they often cause chronic infections. Biofilm-positive strains may be clinically more important than the negative ones. The aim of this work was to evaluate: 1) the influence of culture conditions on biofilm formation; 2) the importance of the biofilm detection (including the presence of ica operone) for the evaluation of clinical significance in a particular strain; 3) the possibility to use the capillary isoelectric focusing for the differentiation of the biofilm-positive/negative S. epidermidis strains. Biofilm formation was frequently positive in clinically significant isolates from blood than in strains isolated from skin. Isoelectric points (pI) of these strains were determined by means of capillary isoelectric focusing. The biofilm negative strains focused near pI value 2.3, while the biofilm positive strains focused near pI value 2.6. Isoelectric point is a useful criterion for the differentiation between biofilm-positive and biofilm-negative S. epidermidis strains.

Klíčová slova

Staphylococcus epidermidis, biofilm, Congo Red Agar method, Christensen test tube method, ica operone, extracellular polysaccharide matrix, capillary isoelectric focusing, biofilm detection, isoelectric point, slime

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 11. 6. 2007

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 28. 6. 2007
• Vedoucí: prof. MUDr. Miroslav Votava, CSc.

Masarykova univerzita

Lékařská fakulta

Doktorský studijní program / obor:
Všeobecné lékařství / Lékařská mikrobiologie a imunologie