Metoda RT-PCR a její použití při sledování exprese genů obranných proteinů

Mgr. Dana Svobodová

Bakalářská práce

Anotace:

Ergosterol je hlavní sterol vtiny hub. Po aplikaci ergosterolu byla pozorována rostlinná odpov ve form produkce reaktivních forem kyslíku inností NADPH oxidasy bunk, alkalizace média, zmn v toku iont a výroby fytoalexinu. Spustit obrannou reakci rostlin je ergosterol schopen ji v nano-molarní koncentraci a to expresí kyselých forem PR protein a akumulace kyseliny salicylové. Na druhou stranu ergosterol nezpsobuje nekrózu bunk. V této práci popisuji obrannou reakci bunk rostlin tabáku po aplikaci ergosterolu, solubilizovaného v cyklodextrinu, postikem a cestou cévními svazky apíku listu. Namená data ukazují, e ergosterol aktivuje v bukách tabáku expresi PR1a v maximu po 48 hodinách.

Abstract:

Ergosterol is the main sterol of most fungi. Production of active oxygen species, pH changes, alkalinization of medium, changes in ion fluxes and production of phytoalexins were observed after the ergosterol uptake. Ergosterol is able to trigger a defence reaction even in nano-molar concentration in tobacco cells by expression of acidic forms of PR proteins and accumulation of salicylic acid. On the other hand, ergosterol did not provoke tissue necrosis. In this thesis, I demonstrate activation of defence reaction of tobacco cells after the treatment of ergosterol, which was solubilised in 2-hydroxypropyl-Ň-cyclodextrin. Ergosterol was applied by spraying and treatment throught vascular bundles. Presented data shows, that these kinds of application are able activate the expression of gene for PR1a protein. The maximum of gene expression was measured 48 hour after the ergosterol treatment.

Klíčová slova

ergosterol, obranná reakce, genová exprese, PR protein, signální molekula, RT-PCR

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 18. 5. 2006

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 14. 6. 2006
• Vedoucí: doc. Mgr. Jan Lochman, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie