Sulfan produkující enzymy a jejich funkce v kančích spermiích

Bc. Petra Zelinková

Diplomová práce

Enzymes producing sulfan and their functions in boar sperm

Anotace:

V buňkách je sulfan produkován třemi enzymy: Cystathionin β-syntázou (CBS), cystathionin – γ – lyázou (CSE) a merkaptopyruvát sulfurtransferázou (MPST). Výskyt těchto enzymů v kančích spermiích nebyl dosud přesněji popsán.Kančí spermie byly pro pokusy získávány z komerčně dostupných inseminačních dávek. A kapacitovány v kapacitačním médiu v termostatu při 37°C po dobu 30, 60, 90 a 120 minut. Sulfan produkující enzymy (CSE, CBS, MPST) byly sledovány ve spermiích pomocí metody Western blott a imunocytochemicky. Využity byly komerčně dostupné protilátky proti cystathionine-β-syntáze, cystathionine-γ-lyáze a 3-merkaptopyruvát sulfurtransferáze. Exprese sulfan produkujících enzymů byla prokázána jak metodou Western blot tak imunocytochemicky. Exprese enzymů se s délkou kapacitace snižovala. Na základě získaných výsledků se lze domnívat, že signální dráha sulfanu je v kančích spermiích funkční a podílí se na procesu kapacitace.

Abstract:

Sulphane is produced in cells by three enzymes: Cystathionine β-synthase (CBS), cystathionine - γ - lyase (CSE) and mercaptopyrrolidine sulfurtransferase (MPST). The presence of these enzymes in boar sperm has not been described yet.Boar spermatozoa for experiments were obtained from commercially available insemination doses and capacitated in a capacitor medium in a thermostat at 37 ° C for 30, 60, 90 and 120 minutes. Sulfan-producing enzymes (CSE, CBS, MPST) were monitored in sperms by Western blotting and immunocytochemistry. There were used commercially available antibodies against cystathionine-β-synthase, cystathionine-γ-lyase and 3-mercaptopyruvate sulfurtransferase. The expression of sulfane-producing enzymes has been demonstrated by Western blot and immunocytochemistry. The enzyme expression decreased with length of the capacitation. Based on the results, it can be presumed that the sulphane signaling pathway is functional in boar spermatozoa and is involved in the process of capacitation.

Klíčová slova

Sulfan, CBS, CSE, MPST, Spermie

Keywords

Sulphan, CBS, CSE, MPST, Spermatozoa

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 10. 4. 2019

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: prof. Ing. Mgr. Markéta Sedmíková, Ph.D.

Česká zemědělská univerzita v Praze

Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů

Magisterský studijní program / obor:
Biotechnologie / Reprodukční biotechnologie