Enzymatické reaktory na monolitických stacionárních fázích

Bc. Anna Kosmáková

Bakalářská práce

Immobilized monolithic enzymatic reactors

Anotace:

Bakalářská práce se věnuje přípravě a charakterizaci monolitického enzymatického reaktoru využitelného v proteolytickém štěpení proteinů. Teoretická část práce se věnuje úvodu do proteomiky, a dále pak chemickým reaktorům, způsobům imobilizace enzymu na pevný nosič a přípravě, vlastnostem a modifikacím imobilizovaných enzymových reaktorů na bázi monolitů (IMERs). Praktická část se zabývá přípravou organického polymerního monolitu uvnitř křemenné kapiláry, modifikací povrchu monolitu a optimalizací způsobu imobilizace trypsinu na monolitickou stacionární fázi. Trypsin je následně využit ke štěpení proteinu α-kaseinu. Sekvence peptidů vzniklých štěpením proteinu na monolitickém enzymovém reaktoru byly následně porovnány s výsledky dosaženými štěpením proteinu v roztoku.

Abstract:

The aim of this bachelor thesis is the preparation and characterization of immobilized enzymatic reactor applicable in a proteomic analysis. The theoretical part of thesis deals with an introduction to proteomics, chemical reactors, methods of immobilization of the enzyme on a solid support, and also with the preparation, characterization, and modification of immobilized enzyme reactors based on monoliths (IMERs). The practical part deals with the preparation of an organic polymer monolith within the fused-silica capillary, modification of the monolith surface, and optimization of the trypsin immobilization on a monolithic stationary phase. Immobilized trypsin is then used to cleave the α casein protein. The sequences of peptides resulting from digestion on IMER were then compared with results obtained by digestion of protein in the solution.

Klíčová slova

Monolitické stacionární fáze, monolity, imobilizace enzymů, enzymatický reaktor, proteomika, kapilární reaktor, roubování Monolithic stationary phases, monoliths, immobilization of enzymes, enzymatic reactor, proteomics, capillary reactor, grafting

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 15. 6. 2021

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 29. 6. 2021
• Vedoucí: doc. RNDr. Jiří Urban, Ph.D.
• Oponent: Mgr. Filip Smrčka

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Chemie / Analytický chemik - manažer chemické laboratoře