Transformace rostlin jarního ječmene kódující Cas9 nukleázu k získání tolerance k WDV.

Bc. Michal NAKLÁDAL

Diplomová práce

Transformation of spring barley plants expresing Cas9 nuclease to induce tolerance to WDV

Anotace:

Virus zakrslosti pšenice (WDV), je závažný virový patogen pšenice a ječmene, způsobující značné ztráty na výnosech. Jednou z možností navození tolerance proti WDV v rostlinách je využití technologie CRISPR/Cas. Diplomová práce se zabývá přípravou tří rozdílných expresních vektorů nesených plazmidem. Do expresních vektorů byly vloženy tři rozdílné protospacery vycházející ze sekvencí v genech CP, MP a Rep viru WDV. Expresní vektory byly, každý zvlášť, transformovány do rostlin jarního ječmene nesoucích Cas9 nukleázu pomocí Agrobacterium tumefaciens. Transformace expresní kazety do rostlin jarního ječmene byla ověřena detekcí na úrovni DNA pomocí metody PCR.

Abstract:

Wheat Dwarf virus (WDV) is a serious viral pathogen of wheat and barely, causing significant yeld losses. One of the options to induce tolerance against WDV in plant is the use of technology CRISPR/Cas. The diploma thesis deals with the preparation of three different expression vectors carried by a plasmid. Three different protospacers based on sequences in the CP, MP and Rep genes of the WDV virus were inserted into the expression vectors. The expression vectors were individually transformed into spring barely plants carrying the Cas9 nuclease using Agrobacterium tumefaciens. The transformation of the expression cassette into spring barely plants was verified by detectio at the DNA level using the PCR method.

Klíčová slova

Ječmen, CRISPR/Cas9, transformace, rezistence, WDV

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 25. 7. 2023

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Ing. Ludmila Ohnoutková, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biologie / Experimentální biologie