Ověření cytostatických a protizánětlivých účinků fukoxanthinu v různých typech buněčných kultur

Bc. Anna MICHALČÍKOVÁ

Master's thesis

Abstract:

Tato práce se zaměřuje na karotenoidy ze skupiny xantofylů - fukoxanthin a 19'-hexanolyoxyfukoxanthin. Oba tyto xantofyly byly získány z modelového organismu Emiliania huxleyi. Fukoxanthin má pro organismus příznivé vlastnosti, mezi které patří - antioxidační, protirakovinné, protizánětlivé a imunitu podporující účinky. Kvalifikační práce je rozdělena do několika částí, v nichž jsou metody seskupeny podle zkoumaných skutečností. Hlavním cílem této práce je ověření cytostatických a protizánětlivých účinků na různých typech buněčných kultur - HeLa, HL-60, HepG-2 a fibroblasty získané z mladé morčecí ledviny. Metody použité v této práci zahrnují HPLC, spektrofotometrii, SN-ELISA, qRT-PCR, průtokovou cytometrii, přežívací eseje (alamarBlue a Trypanovou modř), proteomickou analýzu a mikroskopické metody. Metody CCK-8, plaková titrace a imunofluorescence testovaly antivirotickou aktivitu na buňkách A549. Experimenty potvrdily cytostatické a protizánětlivé účinky Fx i hFx a podařilo se získat informace o proteinech produkovaných HeLa buňkami při různých dobách inkubace. Nakonec byla testována antivirotická aktivita Fx a hFx na TurboGFP-TBEV.

Abstract:

This thesis focuses on a carotenoid from the xanthophyll group - fucoxanthin and 19'-hexanolyoxyfucoxanthin. Both these xanthophylls were extracted from the model organism Emiliania huxleyi. Fucoxanthin has beneficial properties for the body, which include - antioxidant, anticancer, anti-inflammatory, and immune-supporting effects. The qualification work is divided into several sections in which the methods are grouped according to the fact under investigation. The main aim of this thesis is to verify the cytostatic and anti-inflammatory effects on different cell culture types - HeLa, HL-60, HepG-2, and fibroblasts obtained from young guinea pig kidney. The methods used in this work include HPLC, spectrophotometry, SN-ELISA, qRT-PCR, Flow Cytometry, survival essays (alamarBlue and Trypan Blue), proteomic analysis and microscopic methods. Methods CCK-8, plaque titration assay and immunofluorescence were testing antiviral activity on A549 cells. The experiments confirmed the cytostatic and anti-inflammatory effects of both Fx and hFx and succeeded in obtaining information on the proteins produced by HeLa cells at different incubation times. Finally, the antiviral activity of Fx and hFx was tested on TurboGFP-TBEV.

Keywords

Karotenoidy, fukoxanthin, rakovina, tkáňové kultury, HL-60, HeLa, HepG-2, fibroblasty, A549.

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 12. 4. 2024

Thesis defence

• Supervisor: doc. RNDr. Jindřich Chmelař, Ph.D.

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Science

Master programme / field:
Klinická biologie / Clinical Biology