Detekce enzymové aktivity Src kinázy imobilizované na magnetických částicích

Bc. Šárka Bednářová

Diplomová práce

Detection of Enzymatic Activity of Src Kinase Immobilized on Magnetic Particles

Anotace:

Diplomová práce se zabývá imobilizací proteinkinázy na magnetický nosič, fosforylací proteinů na tyrosinu a její detekcí. Fosforylace byla provedena u dvou proteinů - alfa-synukleinu a myelinovém bazickém proteinu pomocí volné i imobilizované Src kinázy. Detekce byla provedena metodami Western blotu pomocí dendrimeru pIMAGO a specifických protilátek proti fosforylovanému tyrosinu a hmotnostní spektrometrie. Stabilita imobilizované Src kinázy byla sledována pomocí Src peptidu s analýzou hmotnostní spektrometrií.

Abstract:

The thesis deals with the immobilization of protein kinase on a magnetic carrier, the phosphorylation of proteins on tyrosine and its detection. Phosphorylation was performed on two proteins - alpha-synuclein and myelin basic protein using both soluble and immobilized Src kinase. Detection was performed by Western blot methods using pIMAGO dendrimer and specific antibodies against phosphorylated tyrosine and mass spectrometry. The stability of immobilized Src kinase was monitored using Src peptide and mass spectrometry analysis.

Klíčová slova

Fosforylace, fosfoproteiny, Src kináza, imobilizace enzymu, alfa-synuklein, myelinový bazický protein, tau protein

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 5. 5. 2023

Zveřejnit od: 31. 12. 2999

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Mgr. Marcela Slováková, Ph.D.

Univerzita Pardubice

Fakulta chemicko-technologická

Magisterský studijní program / obor:
Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví / Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví