Vývoj, optimalizace a validace analytické metody na stanovení neurotoxinu \recke{beta\recke{}}-N-methylamino-L-alaninu ve vodě a sinicích pomocí LC/MS

Bc. Karel HOŘEJŠÍ

Diplomová práce

Anotace:

Tato práce se zabývá vývojem, optimalizací a validací analytické metody na stanovení neurotoxinu -N-methylamino-L-alaninu ve vodě a sinicích pomoci LC/MS. Jako první bylo provedeno ověření základních parametrů analytické metody vyvinuté v rámci bakalářské práce autora. Pro ověření byly vybrány následující parametry: volba vhodných MRM přechodů, napětí aplikované na S-čočky a F-čočky a normalizovaná kolizní energie. Za druhé bylo provedeno testování vhodnosti systému. Za třetí, analytická metoda byla úspěšně validována. Dále bylo provedeno testování a optimalizace extrakce na tuhou fázi pro analýzu vzorků vody. Pro optimalizaci byly vybrány pH vzorku a složení elučního činidla. Kromě toho byla také provedena extrakce kyselinou trichloroctovou s kyselou hydrolýzou pro vzorky sinic. Nakonec byly obě metody, jak extrakce na tuhu fázi, tak extrakce trichloroctovou kyselinou, vyhodnoceny a aplikovány na reálných vzorcích.

Abstract:

This master thesis deals with the development, optimization and validation of an analytical method for determination of neurotoxin -N-methylamino-L-alanine in pond water and cyanobacteria using LC/MS. Firstly, basic parameters of the analytical method developed within authors´s bachelor thesis were verified. Following parameters were selected for verification: selection of suitable MRM transitions, voltage applied to S-lens and F-lens and standardized collision energy. Secondly, the system suitability testing was performed. Thirdly, the analytical method was successfully validated. Then, the testing and optimization of solid phase extraction for analysis of water samples were carried out. The pH of sample solution and composition of elution solution were chosen for the optimization. In addition, the trichloroacetic acid extraction with acid hydrolysis for cyanobacterial samples was carried out too. Finally, both solid phase extraction and trichloroacetic acid extraction were evaluated and applied to the analysis of real samples.

Klíčová slova

\recke{beta\recke{}}-N-methylamino-L-alanin, extrakce kyselinou trichlorooctovou, extrakce tuhou fází, hmotnostní spektrometrie, kapalinová chromatografie, neurodegenerativní onemocnění, optimalizace, testování vhodnosti systému, validace

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 18. 4. 2018

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Ing. David Kahoun, Ph.D.

JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Chemie / Chemie životního prostředí