Transport biologicky aktivních stilbenoidů a jejich derivátů v in vitro modelu střevní sliznice

Bc. Kateřina Klofáčová

Master's thesis

Transport of biologically active stilbenoids and their derivatives in intestinal epithelium model in vitro

Abstract:

Stilbenoidy jsou sekundární metabolity mnoha rostlinných druhů. Slouží především jako ochranný faktor proti mnohým stresorům, jako jsou například škůdci, plísně či nepříznivé vnější podmínky. Jsou součástí rostlinné složky stravy lidí již od pradávna. Nachází se v nadzemních i podzemních částech rostlin, z nichž mezi nejčastěji uváděnými jsou bobule vinné révy, plody moruše a mnoho dalších. Mezi nejvýznamější a současně nejznámější zástupce lze zařadit resveratrol, který se dostal do povědomí veřejnosti díky tzv. „francouzskému paradoxu“. Tato práce měla za cíl sledovat osud stilbenoidů a jejich derivátů v prostředí střevní sliznice. Úkolem bylo popsat biodynamické procesy probíhající na úrovni střevní sliznice při konzumaci stilbenoidů, a to pomocí LC/MS s ultravysokým rozlišením. Pokusem bylo zjištěno, že afinita prenylovaných stilbenoidů ke střevním buňkám je natolik silná, že prenyly dále pravděpodobně nepřechází do krevního řečiště. Tuto skutečnost však nelze zcela vyvrátit, protože je možné, že sloučeniny tvoří různé komplexy s látkami nezahrnutými do naší studie (proteiny a další biologické makromolekuly) a aktivita těchto komplexů se také může v biologických procesech uplatňovat. Pro některé testované látky však byly nalezeny námi předpokládané glukoronidové nebo hydroxylové konjugáty, které mohou mít specifickou biologickou aktivitu odlišnou od původních molekul.. Hypotéza, že se prenylované stilbenoidy dostávají do krevního řečiště je naším pokusem částečně vyvrácena, avšak jejich potenciál při kumulaci uvnitř buněk střevního epitelu je stále nedozírný. Depotní intraceluární zásoby vykazují v některých studiích větší důležitost než přítomnost v krevním řečišti.

Abstract:

Stilbenoids are considered to be the secondary metabolites of many plant species. Their primary function includes protection against many stressors, such as pests, mould or adverse external conditions. Moreover, they are an important part of the plant component of human food. They are located in both the above-ground and underground parts of plants among which the most frequently mentioned are vine berries, mulberry fruits etc. Resveratrol is the most significant and the best-known representative that became known to the public due to the “French paradox”. This work aimed to monitor the fate of stilbenoids and their derivatives in the intestinal mucosa. The task was to describe the biodynamic processes taking part at the intestinal mucosa´s level during the consumption of stilbenoids, using ultra-high-resolution LC / MS. The experiment discovered that the affinity of prenylated stilbenoids to intestinal cells is so strong that prenyls no longer pass into the bloodstream. This fact cannot be completely refuted,because it is possible that the compounds form creates complexes with substances not included in our study (proteins and other biological macromolecules) and the activity of these complexes may also be included in biological processes. However glucuronide or hydroxyl conjugates were found in a few samples, which may have a specific biological activity different from the original molecules. However, glucuronide or hydroxyl conjugates were found in a few samples.The hypothesis of getting prenylated stilbenoids into the bloodstream is disproved by our experiment. Nevertheless, the potential of prenylated stilbeniods for accumulation within intestinal epithelial cells is still unimaginable. In some studies, depot intracellular stores are more important than their presence in the bloodstream.

Keywords

stilbeny, permeabilita, metabolismus, LC/MS, Q-TOF

Keywords

stilbenes, metabolism, LC/MS, Q-TOF, permeability assay

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 26. 4. 2021

Thesis defence

• Supervisor: Mgr. Petr Maršík, Ph.D.
• Reader: Radka Podlipná, externi

Czech University of Life Sciences Prague

Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources

Master programme / field:
Nutrition and Foodstuffs / Nutrition and Foodstuffs