Rozhovory přes kutikulu: Molekulární aspekty interakce ve vývoji průduchů a syntéze vosků v kutikule.

Bc. Simona KOUTKOVÁ

Diplomová práce

Anotace:

Hlavním cílem diplomové práce bylo podpořit hypotézu, že vývoj kutikuly a průduchů u rostlin je na molekulární úrovni propojen. Na listech huseníčku rolního (Arabidopsis thaliana) byl zkoumán vliv třech transkripčních faktorů SHN (SHINE) patřící do rodiny AP2/EREBP (APETALA2/ ethylene-responsive element binding protein). Byly vyselektovány homozygotní linie s T-DNA inzercí v SHN1 (WIN1), SHN2 nebo SHN3 genu získané ze SALK institutu. Hypotéza, že SHN geny jsou jedním z klíčových genů účastnící se vývoje průduchů a kutikuly, byla potvrzena. Zvýšená exprese SHN genů mírně stimulovala množství epikutikulárních vosků v kutikule a snižovala počet průduchů v pokožce listů. Opačný efekt snížené exprese SHN genů na množstí vosků a počet průduchů nebyl potvrzen. Fenotyp mutantních rostlin byl zjišťován Kryo-elektronovou mikroskopií, dále pomocí metody Real-Time RT-PCR byla zjišťována relativní míra exprese vybraných genů účastnících se obou vývojových drah, plynovou chromatografií s hmotnostním spektrometrem (GC-MS) byly analazovány alkany a aldehydy v epikutikulárních voscích listu.

Abstract:

The main aim of the thesis was to find a connection between the cuticular and stomatal development on the molecular level. The SHN (SHINE) genes, which encode SHN transcription factors and belong to AP2/EREBP (APETALA2/ ethylene-responsive element binding protein) family, were investigated. Homozygous mutant lines of Arabidopsis thaliana with T-DNA insertion in SHN1 (WIN1), SHN2, or SHN3 gene were acquired from SALK lines. The hypothesis that SHNs are one of the crucial genes involved in stomatal and cuticular development was confirmed. The overexpression of the SHN genes gently stimulated epicuticular wax deposition and decreased stomatal density. The opposite effect of the SHNs downregulation on the cuticle and stomatal development was not supported. Cryo-electron microscopy; Real-Time RT-PCR of some genes involved in both cuticular or stomatal development; GC-MS (gas chromatography mass spektrometry) of some compounds of the plant cuticle were performed.

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 13. 4. 2023

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Ing. Marie Hronková, Ph.D.

JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biologie / Experimentální biologie - specializace Fyziologie rostlin