Sulfan produkující enzymy u kančích spermií během epididymální maturace.

Bc. Aneta Pilsová

Diplomová práce

Sulphan-producing Enzymes in Boar Sperm in Course of Epididymal Maturation.

Anotace:

Sulfan je vedle oxidu dusnatého (NO) a oxidu uhelnatého (CO) třetím prokázaným gasotransmiterem produkovaným endogenně v organismu. Společně s NO a CO patří do skupiny signálních molekul. Cílem teoretické části práce bylo shrnutí dosavadních poznatků o spermiogenezi a následujících dějů vedoucích k oplození, zaměřené především na epididymální maturaci, kapacitaci a akrozomální reakci, přičemž stěžejním oddílem byla právě epididymální maturace spermií. Dále literární rešerše pojednává o funkci, produkci a metabolismu sulfanu a podrobněji o enzymech, které tuto molekulu produkují. Praktická část byla zaměřena na průkaz přítomnosti sulfan produkujících enzymů v kančích spermiích izolovaných z caput, corpus a cauda epididymis. Mezi detekované enzymy patřila cystathionin-β-syntáza (CBS), cystathionin-γ-lyáza (CTH) a 3-merkaptopyruvát sulfurtransferáza (3-MST). Exprese těchto enzymů byla sledována imunocytochemicky a poté byla hodnocena po snímání na konfokálním mikroskopu analýzou obrazu. Jako kontrolní metoda byl použit Western blot. Přítomnost sulfan produkujících enzymů byla ve všech částech kančího epididymu prokázána. Exprese enzymů v epididyálních spermiích v průběhu epididymální maturace klesala.

Abstract:

Besides nitric oxide (NO) and carbon monoxide (CO) hydrogen sulphide is the third proven endogenously produced gasotransmiter in organism. This molecule along with NO and CO belongs to the signal molecule group. The aim of theoretical part of this thesis was to summarize present knowledge of spermiogenesis and following actions leading to fertilization, particularly epididymal maturation, capatitation and acrosome reactione, whereas the main part was epididymal maturation. The literature research further follows up hydrogen sulfide function, production and metabolism and in detail enzymes which are responsible for hydrogen sulphide production.Practical part was focused on the proof of hydrogen sulphide producing enzymes in boar sperm isolated from caput, corpus and cauda epididymis. Among detected enzymes belonged cystathionin-β-synthase (CBS), cystathionin-γ-lyase (CTH) and 3-marcaptopyruvate sulfurtransferase (3-MST). The expression of these enzymes was observed using imunocytochemistry and it was after evaluated by the scanning confocal microscope image analysis. Western blot was used as a control method. The presence of these enzymes was proven in every part od boar epididymis. The expression of hydrogen sulphide producing enzymes was during the epididymal maturation decreasing.

Klíčová slova

Spermie, Maturace, Epididymus, Sulfan produkující enzymy

Keywords

Sperm, Maturation, Epididymus, Sulphan-producing enzymes

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 27. 4. 2021

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: prof. Ing. Mgr. Markéta Sedmíková, Ph.D.

Česká zemědělská univerzita v Praze

Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů

Magisterský studijní program / obor:
Biotechnologie / Reprodukční biotechnologie