Studium transkripčních faktorů v houbě Claviceps purpurea

Jana BIOVÁ

Bakalářská práce

Study of transcription factors in the fungus Claviceps purpurea

Anotace:

C. purpurea je parazitická houba, která produkuje námelové alkaloidy. Námelové alkaloidy mají z hospodářského hlediska dvojí význam, jednak můžou způsobit kontaminaci hospodářských plodin, nebo mohou být využity ve farmaceutickém průmyslu. Cílem této práce bylo připravit nadprodukční a deleční mutanty dvou genů u tohoto organismu. A to genů Cpur01124 a Cpur05433, pravděpodobně kódujících transkripční faktory. V rámci experimentální práce byly transformovány protoplasty C. purpurea kmene 20.1 připravenými konstrukty pomocí PEG. Přítomnost konstruktu v genomu byla po selekci transformovaných hub pomocí antibiotika potvrzena pomocí PCR. Byli identifikováni nadprodukční mutanti obou vybraných genů, u kterých byla potvrzena i funkčnost vloženého konstruktu pomocí fluorescenční mikroskopie. Deleční mutanty ani jednoho z vybraných genů se připravit nepodařilo.

Abstract:

C. purpurea is a parasitic fungus that produces ergot alkaloids. Ergot alkaloids are economically unfavorable or favorable substances. They can cause the contamination of agronomically important crops or on other side they can be used in pharmaceutic industry. The aim of this work was to prepare overexpressing and knock-out mutants of two genes of this organism. The two genes Cpur01124 and Cpur05433 are putative transcription factors. In the experimental part of this work, the protoplasts of C. purpurea strain 20.1 were transformed with prepared constructs using PEG. After selection of transformed fungi on media with antibiotics, the presence of the construct in the genome was confirmed by PCR. Overexpressing mutants of both selected genes were identified and function of the introduced constructs was confirmed using fluorescent microscopy. Successful preparation of knock-out mutants was not confimed

Klíčová slova

Claviceps purpurea, transkripční faktory, transformace, Cpur01124, Cpur05433

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 6. 5. 2016

Zveřejnit od: 6. 5. 2016

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Mgr. Mária Majeská Čudejková, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie