Stanovení baktericidních koncentrací vybraných přírodních látek

Bc. Naděžda Šoukalová

Diplomová práce

Determinacion of bactericidal concentrations of

Anotace:

Zjišťovali jsme minimální inhibiční (MIC) a minimální baktericidní (MBC) koncentrace vybraných přírodních látek a jejich kombinací mikrodiluční metodou v Mueller-Hintonově bujónu. Testovali jsme jednotlivě cymen, ethyl-gallát, ethylhydroxybenzoát, eugenol, karvakrol, cnicin, kyselinu gallovou, methyl-gallát, methylhydroxybenzoát, quercetin, thymol, tea tree oil a dvojkombinace karvakrolu s eugenolem, thymolem, methylgallátem, ethylgallátem, kyselinou gallovou, dále thymolu s eugenolem, ethylgallátem, cnicinem a kyselinou gallovou, cnicinu s karvakrolem, eugenolem, cymenem a kyseliny gallové s eugenolem. Látky jsme rozpouštěli v 96% a 24% ethanolu. Pro stanovení jsme používali kmeny izolované z kančích ejakulátů - Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa a Staphylococcus hyicus a referenční kmeny Enterococcus faecalis CCM 4224, Escherichia coli CCM 3954, Pseudomonas aeruginosa CCM 3955 a Staphylococcus aureus CCM 3953. Jeden kmen Pseudomonas aeruginosa pocházel v naší laboratoři z výtěru ucha psa. Nejnižší hodnoty MIC i MBC jsme shodně zaznamenali u karvakrolu a thymolu rozpuštěných v 96% ethanolu- 37,5 - 4800 ?g/ml. Z látek rozpouštěných ve 24% ethanolu byl nejúčinnější thymol - 150-600 ?g/ml. Nejúčinnější byla kombinace karvakrolu s thymolem rozpuštěných v 96% ethanolu - MIC i MBC 37,5:37,5 - 300:600 ?g/ml. Nejnižší hodnoty látek v kombinaci rozpouštěných ve 24% ethanolu, jsme zaznamenali u cnicinu s thymolem - MIC 75:37,5 - 150:300 ?g/ml a MBC 37,5:75 - 2400:300 ?g/ml. Výsledky byly ovlivněny rozpustností přírodních látek v použitém rozpouštědle. Při rozpouštění ve 24% ethanolu byly hodnoty MIC a MBC vyšší ve srovnání s hodnotami látek rozpouštěných v 96% ethanolu.

Abstract:

We analyzed minimal inhibitory (MIC) and minimal bactericidal concentrations (MBC) of selected substances and combinations of those using micro-dilutionary method in Mueller-Hint broth. We tested separately cymen, ethylgallate, ethyl-hydroxy-benzoate, eugenol, carvacrol, cnicin, gall acid, methylgallate, methyl-hydroxy-bensoate, quercetin, thymol, tea tree oil and combinations of carvacrol with eugenol, thymol, methylgallate, ethylgallate, gall acid, and thymol with eugenol, ethylgallate, cnicin, gall acid, cnicin with carvacrol, eugenol, cymen, and gall acid with eugenol. We dissolved the substances in 96% and 24% ethanol. For determination we used strains isolated from boar's ejaculate - Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, and Staphylococcus hyicus, and referential strains Enterococcus faecalis CCM 4224, Escherichia coli CCM 3954, Pseudomonas aeruginosa CCM 3955, and Staphylococcus aureus CCM 3953. One of the strains in our laboratory, Pseudomonas aeruginosa, was derived from swab from dog's ear. We recorded the lowest MIC and MBC values in case of both carvacrol and thymol dissolved in 96% ethanol - 37,5 - 4800 ?g/ml. The most potent of the substances dissolved in 24% ethanol was thymol - 150 - 600 ?g/ml. The most potent was a combination of carvacrol and thymol dissolved in 96% ethanol - 37,5:37,5 - 300:600 ?g/ml. The lowest MIC and MBC values of combined substances dissolved in 24% ethanol were recorded in case of cnicin and thymol - 75:37,5 - 150:300 ?g/ml and MBC 37,5:75 - 2400:300 ?g/ml. The results were affected by dissolvability of substances in dissolvent we used. When dissolved in 24% ethanol the MIC and MBC values were higher than values of substances dissolved in 96% ethanol.

Klíčová slova

přírodní látky, antibakteriální aktivita, mikrodiluční metoda, Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Escherichia coli

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 9. 5. 2008

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 3. 6. 2008
• Vedoucí: doc. MVDr. Jaroslava Mazurová, CSc.

Univerzita Pardubice

Fakulta chemicko-technologická

Magisterský studijní program / obor:
Speciální chemicko-biologické obory / Analýza biologických materiálů