Příprava rekombinantních plasmidů pro studium interakcí DNA-protein in vivo

Bc. Monika KOPEČKOVÁ

Diplomová práce

Making of recombinant plasmids for the study of DNA-protein interactions in vivo.

Anotace:

Rekombinantní technologie umožňují vytvářet rekombinantní molekuly DNA. Nově vytvořené molekuly DNA mohou nést různé geny a mohou být vkládány do recipientních organismů. V této diplomové práci je popsán základní postup přípravy rekombinantních plazmidů, které mají sloužit k detekci interakce DNA-protein. V práci byl použit plazmidový kyvadlový vektor pGAS-TA-luc, do kterého byly vkládány sekvence z promotoru genu Cyklinu G1. Sekvence obsahují konsesní místo pro protein p53 a byly vkládány před reportérový gen pro luciferázu. Vytvořené rekombinantní plazmidy byly transformovány do bakterií Escherichia coli a následně měly sloužit pro detekci interakce DNA-protein.

Abstract:

Recombinant technologies unable production of recombinant molecules of DNA. This way, the generated molecules may carry various genes and can be inserted into designated recipient organisms. This thesis work outlines the basic procedure of recombinant plasmid production. The plasmids, in general, have an ability to detect DNA-protein interaction that, in this work, will be crucial further on. The laboratory experiment was carried out by using a plasmid shuttle vector pGAS-TA-luc enriched in sequences from promoter gene Cycline G1. The sequences containing a concession site for protein p53 were inserted before reporter gene for luciferase. Produced recombinant plasmids were transformed into Escherichia Coli bacteria where they served as the detection for prospective DNA-protein interactions.

Klíčová slova

genové inženýrství, rekombinantní technologie, metody interakce DNA protein, protein p53

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 27. 4. 2015

Zveřejnit od: 27. 4. 2015

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 19. 5. 2015
• Vedoucí: doc. RNDr. Petr Pečinka, Ph.D.

OSTRAVSKÁ UNIVERZITA V OSTRAVĚ

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biologie / Experimentální biologie