Studie vybraných druhů rodu sekavec (Cobitis) pomocí metody barvení kostí a chrupavek

Bc. Petra Marešová

Diplomová práce

Study of selected species of genus Cobitis using clearing and staining method

Anotace:

Tato práce je věnována studiu vybraných druhů rodu sekavec (Cobitis), které obývají vody v oblasti Balkánského poloostrova. První část je zaměřena na přiblížení rodu sekavec; jeho fylogenetický vývoj, tvarovou charakteristiku, rozšíření v evropských vodách a specifický způsob rozmnožování gynogenezí, kdy vznikají hybridní komplexy. Ve druhé části jsou blíže popsány čtyři druhy sekavců, jenž byly použity jako materiál pro experimentální část práce: C. arachthosensis, C. hellenica, C. meridionalis a C. trichonica. Navazující část je zaměřena na vysvětlení potřeby taxonomie a systematiky pro určování vztahů mezi jednotlivými taxony. Proč je nutné znát morfologické charakteristiky zkoumaných zvířat, především jejich anatomickou strukturu, kterou lze zkoumat například metodou barvení kostí a chrupavek. Té je věnována experimentální část práce. Metoda barvení kostí a chrupavek je založena na enzymatickém trávení proteolytického enzymu trypsinu, který v reakci s boraxem způsobí zprůhlednění svalové tkáně drobných obratlovců. Díky následnému obarvení kostí alizarinovou červení a chrupavek alkalickou modří je umožněno pozorovat opěrnou soustavu zvířat a případně ploutevní paprsky ryb.Laboratorní práce byly provedeny dvakrát; poprvé v říjnu roku 2017, kdy se jednalo o zkušební aplikaci a výsledek byl uspokojivý. Druhý experiment proběhl o rok později.Metoda byla použita na 11 samicích sekavců. Materiál nebyl uniformní v typu konzervace (formaldehyd x alkohol) a v délce konzervace (5-9 let). U všech jedinců došlo k úplnému zprůhlednění svalové tkáně, avšak bez výrazného obarvení kostí a chrupavek. U několika jedinců došlo k obarvení nervové soustavy. Díky následnému zvětšení jedinců pod binokulární lupou bylo možné u materiálu spočítat páteřní obratle a ploutevní paprsky, což umožnilo charakterizovat jednotlivé druhy sekavců. Celý průběh laboratorních prací byl fotograficky zaznamenán a je součástí práce.

Abstract:

This thesis is dedicated to the study of selected species of genus Cobitis inhabiting the waters in vicinity of Balkan Peninsula.The first part of the thesis focuses on examining the genus of loach; its phylogenetic development, the shape characteristics, its distribution in the European waters and the specific way of its reproduction by gynogenesis leading to the formation of hybrid complexes.The second part describes the four species of loaches which were utilised as material for the thesis experiment: C. arachthosensis, C. hellenica, C. meridionalis and C. trichonica.The following part explains the need for taxonomy and systematics to determine relationships between each individual taxa. It looks into the necessity of distinguishing the morphological characteristics of the examined animals, especially their anatomical structure. One of the ways this can be investigated for example by the bone and cartilage staining method. This method is further investigated in the experimental part of the thesis.The method of bone and cartilage staining is based on the enzymatic digestion of theproteolytic enzyme trypsin. Its reaction with borax makes the muscle tissue of small vertebrates more transparent. Due to the subsequent staining of bones by the alizarin red and the staining cartilage by blue alkaine, it is possible to observe the skeletal system of animals, possibly their fin rays.Laboratory experiments were performed twice; for the first time in October 2017, which was a trial application with satisfactory results. The second experiment took place a year later.The method was applied on 11 female loaches. The material was not uniform reagrds to preservation (formaldehyde x alcohol) and the preservation length (5-9 years).All individuals showed complete transparency in the muscle tissue, however with no significant bone or cartilage staining. Nervous system was sufficiently stained in some specimen.Due to the subsequent enlargement of the specimen under the binocular magnifier, it became possible to count he spinal vertebraes and the fin rays, which allowed for characterisation of the specific loach species. All laboratory work was recorded photographically and is included in the thesis.

Klíčová slova

preparace, Cobitis, hybridizace, anatomie, taxonomie

Keywords

Cobitis, hybrdisation, preparation, anatomy, taxonomy

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 11. 4. 2019

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Ing. Miloslav Petrtýl, Ph.D.

Česká zemědělská univerzita v Praze

Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů

Magisterský studijní program / obor:
Zootechnika / Živočišná produkce