Posouzení rozdílnosti stability glukózy ve dvou odběrových systémech

Jana DVOŘÁKOVÁ

Bachelor's thesis

Assess the stability of glucose in different Sampling Systems

Abstract:

Abstrakt Sacharidy představují jednu ze základních stavebních složek všech organismů. Tato skupina organických látek je nejsnáze získatelným a nejpohotovějším zdrojem energie. Pro lidský organismus má základní fyziologický význam glukóza, která je nejrychlejším zdrojem energie pro všechny tělesné tkáně, pro buňky mozku a červené krvinky představuje jediný zdroj energie, bez kterého se neobejdou. Při poruše metabolismu sacharidů vzniká onemocnění diabetes mellitus, česky řečeno cukrovka. Nárůst onemocnění diabetem v posledních letech vzrostl do epidemických rozměrů a stal se vážnou civilizační hrozbou lidského zdraví. Proto je stanovení hladiny glukózy v krvi základním biochemickým vyšetřením, které ukazuje na aktuální stav glukózové homeostázy. Stanovení glykémie má význam především pro prevenci, diagnostiku a dlouhodobé sledování pacientů s diabetem. Vlastní stanovení se provádí v plné krvi, séru nebo plazmě a to buď na lačno nebo postprandiálně. Pro správnou interpretaci výsledků je třeba vědět, že referenční hodnoty se liší podle typu analyzovaného materiálu. Hladinu glukózy v krvi si může změřit i sám pacient pomocí glukometru. Jsou to přístroje sloužící k rychlému, ale pouze orientačnímu měření krevního cukru, které pracují na principu vyhodnocování elektrochemického nebo fotometrického signálu. V laboratořích se ke stanovení glukózy nejčastěji používají metody enzymové (s hexokinázou a glukózooxidázou) nebo metody elektrochemické. Obrovský klinický význam stanovení glukózy v diagnostice diabetu má ale nedostatky v oblasti preanalytiky a stability glukózy ve vzorku. Pokud není glukóza vyšetřena okamžitě po odběru, dochází ke snížení její hladiny. Stabilitu glukózy lze dosáhnout okamžitým ponořením zkumavky se vzorkem do ledové tříště, ale tento způsob nelze uplatnit v rutinní praxi. Proto se používá známý inhibitor glykolýzy fluorid sodný (NaF). Pokud je k odběru použita zkumavka se separačním gelem, který po centrifugaci oddělí krevní elementy od séra, glukóza také vykazuje vyšší stabilitu. Nestabilita glukózy může vést k chybným diagnostickým závěrům. Cílem mé práce bylo stanovení koncentrace glukózy a posouzení její stability v různých odběrových systémech u skupiny 50 osob. Původním záměrem bylo stanovení koncentrace glukózy pouze ve dvou typech zkumavek: ve zkumavce se stabilizátorem NaF a ve zkumavce se separačním gelem, (tento typ zkumavek je v ordinacích lékařů používán nejčastěji), ale pak jsem ještě použila třetí typ zkumavky bez stabilizátoru a bez separačního gelu pro ještě názornější představu (ne)stability glukózy v dalším typu odběrového systému. Měření jsem provedla ve třech časových intervalech: po 1, 6 a 24 hodinách po odběru pomocí nejmodernější laboratorní techniky a následně vyhodnotila a porovnala data naměřených hodnot v rozdílných souborech vzorků. Hladina glukózy měřená 1 hodinu po odběru byla ve všech třech typech zkumavek téměř shodná, podstatnější rozdíly byly naměřeny u vzorků změřených 6 a 24 hodin po odběru. Největší pokles hladiny glukózy byl naměřen u vzorků odebraných do zkumavek bez separačního gelu a stabilizátoru. Proto by krev na vyšetření glykémie měla být odebrána pouze do zkumavek se stabilizátorem nebo do zkumavek se separačním gelem a včas provedena centrifugace. Lékaři v ordinacích by při hodnocení výsledků měli brát v úvahu nestabilitu glukózy a tím i možné snížení naměřené hodnoty glykémie v závislosti na typu použitého odběrového systému a intervalu mezi odběrem a zpracováním vzorku.

Abstract:

Summary Saccharides represent one of the basic building components of all organisms. This group of organic mass is the easiest available and the most ready source of energy. Glucose possesses the basic physiological meaning for the human organism. It is the most rapid source of energy for all body tissues. It represents the only source of energy for brain cells and erythrocytes they cannot do without. The disease called diabetes mellitus originates in the disorder of saccharides metabolism. The increase in diabetes mellitus has become an epidemic recently and a serious civilisation threat of human health as well. The blood glucose estimation is therefore the basic biochemical examination that reflects the topical situation of glucose homeostasis. The blood glucose estimation is meaningful first of all for prevention, diagnostics and long-term follow-up of diabetes patients. The own estimation is performed from the whole blood, serum or plasma, either before or after meals. For the correct interpretation of results it is essential to know that the reference values differ according to the type of material analysed. The patients can measure themselves their blood glucose level by using a glucometer. This is a device serving for the quick but approximate measurement of blood sugar. It works on the principle of evaluating of the electrochemical or photometric signal. In laboratories, the enzyme methods (with hexokinase and glucoseoxidase) or electrochemical methods are mostly used for the glucose estimations. The immense clinical meaning of glucose estimation in the diagnostics of diabetes mellitus is lacking in the field of pre-analysis and stability of glucose in the sample. If the glucose is not estimated immediately after the taking its level decreases. The stability of glucose can be achieved with an immediate immersion of the test-tube with the sample into the drift-ice but this way cannot be applied to the routine practise. That's why the glycolyse inhibitor NaF is used. If a test-tube with a separating gel is used for taking the gel separates the blood elements from serum and glucose presents a higher stability then. The instability of glucose can lead to false diagnostic conclusions. The goal of my study was an estimation of glucose concentration and consideration of its stability in the different sample systems in a group of 50 persons. The original intention was to estimate the glucose concentrations only in two types of test-tubes: with the stabilizer NaF and with the separating gel (this one is mostly used in doctor´s offices), but later on I used the third type of the test-tube for even more object imagination of a (non-)stability in the further type of taking system. I carried out the measurements in 3 time sections: after 1, 6 and 24 h respectively after taking with the help of the most modern laboratory device and then assessed and compared the values in different groups of samples. The glucose levels measured 1 hour after the taking were nearly identical in all 3 types of test-tubes. More significant differences were measured in samples assessed 6 and 24 h after the taking. The greatest decrease of the glucose level was measured in samples taken into test-tubes without separating gel and stabilizer. That´s why blood for glucose estimation should be taken only into the test-tubes with the stabilizer or with separating gel and the centrifugation should be performed soon. The physicians should take into consideration the instability of glucose while evaluating the results and a possible decrease of glycaemia measured value in dependence on the type of taking system and on the interval between taking and processing of the sample.

Keywords

Klíčová, slova, Glukóza, Diabetes, mellitus, Stabilita, glukózy, Stabilizátor, NaF, Odběrový, systém, Separační, gel, Použitá, zkumavka, Časový, interval, Preanalytická, fáze, Enzymové, metody, Měření, vzorku

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 5. 5. 2014

Accessible from:: 5. 5. 2014

Thesis defence

• Supervisor: Ing. Jiří Kronika

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Studies

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Zdravotní laborant