Stanovení alfa-tokoferolu a retinolu v seminální plazmě metodou kapalinové chromatografie

Mgr. Kateřina Myslíková

Master's thesis

The determination of seminal plasma alpha-tocopherol and retinol by liquid chromatography

Abstract:

Retinol a ?-tokoferol patří mezi lipofilní antioxidanty. Vitamin E zabraňuje lipoperoxidaci membrán a chrání tak spermie před poškozením volnými radikály. Stanovili jsme hladiny vybraných retinolu a ? tokoferolu v seminální plazmě pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie s UV/Vis detekcí. Retinol a ?-tokoferol byly separovány na koloně LiChroCART? 250-4, Purospher? STAR RP-18e, 5 ?m, opatřenou ochranou kolonou LiChroCART? 4-4, Purospher? STAR RP-18e, 5 ?m isokratickou elucí. Jako mobilní fáze byl použit 93,5 % ethanol ve vodě. S použitím vnitřních standardů - retinylacetátu a tokoferylacetátu. Hladina retinolu v seminální plazmě se pohybovala u všech pacientů v rozmezí 15,1 ? 6,4 nmol/l, u nekuřáců 15,3 ? 6,1 nmol/l a u kuřáků 14,9 ? 7,1 nmol/l. Hladina ?-tokoferolu v seminální plazmě byla u skupiny všech pacientů v rozmezí 1,90 ? 0,40 ?mol/l, u skupiny nekuřáků 1,93 ? 0,45 ?mol/l a u kuřáků 1,86 ? 0,29 ?mol/l.

Abstract:

Retinol and ?-tocopherol are lipofilic antioxidants. Vitamin E inhibits lipoperoxidation of cell membrane and safe spermatozoa before damage of free radicals. We have measured the levels of retinol and ?-tocopherol in seminal plasma by HPLC with UV/Vis detection. Retinol and ?-tocopherol were separed on a column LiChroCART? 250-4, Purospher? STAR RP-18e, 5 ?m fitted guard column LiChroCART? 4-4, Purospher? STAR RP-18e, 5 ?m with isocratic elution. Mobile phase was 93.5 % ethanol. The retinylacetate and ?-tocopherylacetate were used as internal standards The levels of retinol in seminal plasma were: all patients 15.1 ? 6.4 nmol/L, nonsmokers 15.4 ? 6.1 nmol/L and smokers 14.9 ? 7.1 nmol/L. The levels of ?-tocopherol in seminal plasma were: all patients 1.90 ? 0.40 ?mol/L, nonsmokers 1.93 ? 0.45 ?mol/L and smokers 1.86 ? 0.29 ?mol/L.

Keywords

retinol, ?-tokoferol, HPLC, UV/Vis detekce, seminální plazma

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 4. 5. 2012

Thesis defence

• Date of defence: 7. 6. 2012
• Supervisor: doc. Mgr. Roman Kanďár, Ph.D.

University of Pardubice

Faculty of Chemical Technology

Master programme / field:
Special Chemical and Biological Programmes / Analysis of Biological Materials